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6.3
Principio del ensayo
Your
Power
for Health
PapilloCheck
es un equipo de ensayo basado en micromatrices para la detección y la genotipificación
®
de un fragmento del gen E1 del genoma del virus del papiloma humano (VPH). El procedimiento del
ensayo se resume en la Figura 1.
Antes del análisis PapilloCheck
La toma de muestras y la extracción de ADN no forman parte del equipo de ensayo PapilloCheck
Greiner Bio-One también ofrece productos especializados para la toma de muestras (equipo de toma
de muestras PapilloCheck
deben adquirir por separado (consulte la información sobre pedidos en el capítulo 2).
Después de la extracción de ADN genómico humano y vírico de una muestra cervicouterina,
se amplifica un fragmento de 350 bp del gen E1 vírico mediante la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) en presencia de un conjunto de cebadores específicos del VPH. En la misma
reacción, se amplifica un fragmento de una copia del gen humano ADAT1 (adenosina desaminasa
específica del ARNt humano1) con el fin de controlar la presencia de material de muestra humano
en la muestra cervicouterina (control de muestra) y una plantilla de control interna presente en el
PapilloCheck
PCR MasterMix para controlar el rendimiento de la PCR (control de PCR). Además,
®
el PapilloCheck
®
cruzada de reacciones PCR anteriores mediante el uso del tratamiento con uracil-N-glucosilasa
(UNG) (consulte el capítulo 8.2.2).
A continuación, los productos de la PCR se hibridan según sondas de ADN específicas y controles
en el microchip enlazados a la superficie del microchip de PapilloCheck
12 micromatrices de ADN, lo que permite el análisis simultáneo de 12 muestras cervicouterinas.
Durante la hibridación, el ADN unido se marca de forma fluorescente y el no unido se elimina en los
pasos de lavado subsiguientes. Se supervisa la eficiencia de la hibridación (control de hibridación).
Finalmente, el microchip PapilloCheck
CheckScanner™ y el software CheckReport™, respectivamente (consulte la información sobre
pedidos en el capítulo 2). CheckScanner™ es un escáner láser bicolor (longitudes de onda de
excitación de 532 nm y 635 nm), que permite la detección de la señal fluorescente generada por la
presencia de productos de amplificación específicos de VPH, así como de los controles (consulte
el capítulo 6.4.2). El software CheckReportTM permite visualizar, analizar y evaluar los resultados,
y muestra de forma automática los valores correspondientes tanto de los tipos de VPH detectados
como de los controles en un informe detallado.
El informe indica claramente la presencia o la ausencia de uno o varios de los 24 tipos de
VPH o 14 tipos de VPHAR detectables y los completos controles en el microchip garantizan la
elevada fiabilidad del análisis.
Greiner Bio-One GmbH
Maybachstr. 2
72636 Frickenhausen
Alemania
Fabricado en Austria
Manual de instrucciones de PapilloCheck
Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017
, se debe extraer ADN de una muestra de citología cervicouterina.
®
) y la extracción de ADN (equipo de extracción de ADN oCheck
®
PCR MasterMix contiene dUTP. Por tanto, se puede eliminar la contaminación
se escanea, analiza y evalúa de forma automática mediante
®
465 060-02
505 060
PELIGRO
y PapilloCheck
®
48
high-risk
®
) que se
®
. Cada microchip contiene
®
8 °C
4 °C
.
®
13
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