Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 59

Stem-Trol Κύτταρα μάρτυρα
IM3632
Για In Vitro διαγνωστική χρήση
ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ
Το Stem-Trol Control Cells είναι ένα προϊόν προσδιορισμού ελέγχου ποιότητας για την ανάλυση του
ανοσοφαινότυπου με χρήση αντιδραστηρίων μονοκλωνικών αντισωμάτων CD45 ή/και CD34 και κυτταρομετρίας
ροής. Περιλαμβάνει έναν θετικό μάρτυρα κυττάρων, ο οποίος υποβάλλεται σε επεξεργασία με τον ίδιο τρόπο
όπως ένα δείγμα αίματος όταν το Stem-Trol Control Cells προστίθεται σε δείγμα περιφερικού ολικού αίματος.
Αυτό επιτρέπει την επαλήθευση της απόδοσης των αντιδραστηρίων και των μεθόδων που χρησιμοποιούνται για
τη χρώση των κυττάρων-στόχων (δηλ. των αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων (HPC) CD34+), τη λύση των
ερυθροκυττάρων και την ανάλυση δειγμάτων με κυτταρομετρία ροής.
Ανατρέξτε στο ένθετο συσκευασίας του Stem-Kit Reagents (REF IM3630) για ολοκληρωμένες οδηγίες, σε
περίπτωση που εκτελείτε μη αυτόματη ανάλυση. Ανατρέξτε στο stemCXP System Guide (Οδηγός συστήματος
stemCXP) που παρέχεται με το λογισμικό συστήματος stemCXP, για ολοκληρωμένες οδηγίες, σε περίπτωση που
χρησιμοποιείτε την αυτοματοποιημένη ανάλυση.
ΣΥΝΟΨΗ
Η ανάλυση ανοσοφαινότυπου με χρήση της κυτταρομετρίας ροής περιλαμβάνει την αναγνώριση και
απαρίθμηση των κυττάρων-στόχων σε βιολογικά δείγματα. Πριν από την ανάλυση κυτταρομετρίας ροής, τα
δείγματα ενδιαφέροντος υποβάλλονται σε χρώση με μονοκλωνικά αντισώματα και πραγματοποιείται λύση
των ερυθροκυττάρων.
αντιδραστηρίου, των μεθόδων παρασκευής δειγμάτων και των διαδικασιών χρώσης (1). Ο θετικός μάρτυρας
κυττάρων θα πρέπει να μιμείται ένα αντιπροσωπευτικό κύτταρο-στόχο ως προς την απόδοση του μονοκλωνικού
αντισώματος, τη λύση των ερυθροκυττάρων και την ανάλυση κυτταρομετρίας ροής.
Το Stem-Trol Control Cells είναι ένα υγρής μορφής παρασκεύασμα σταθεροποιημένων κυττάρων προερχόμενων
από KG-1a που εμφανίζουν έκφραση αντιγόνων και ιδιότητες χρώσης των CD45 και CD34, οι οποίες είναι
αντιπροσωπευτικές εκείνων που απαντώνται στα CD34+ HPC.
ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ
Τα Stem-Trol Control Cells είναι διατηρημένα κύτταρα KG-1a που έχουν τροποποιηθεί και σταθεροποιηθεί για
την έκφραση επιτόπων CD34 κατηγορίας III (2) και του κοινού λευκοκυτταρικού αντιγόνου CD45 σε πυκνότητες
που προσεγγίζουν τα φυσιολογικά πρώιμα ανθρώπινα αιμοποιητικά κύτταρα. Ένα μίγμα Stem-Trol Control
Cells που έχει προστεθεί σε φυσιολογικό φρέσκο ολικό αίμα υποβάλλεται πρώτα σε χρώση με τα αντιδραστήρια
μονοκλωνικού αντισώματος και τη χρωστική βιωσιμότητας 7-AAD και, κατόπιν, σε λύση για την αφαίρεση των
ερυθροκυττάρων. Προστίθενται Stem-Count ή Flow-Count Fluorospheres για τον άμεσο προσδιορισμό των
απόλυτων αριθμών. Η κυτταρομετρική ανάλυση του παρασκευάσματος που έχει υποβληθεί σε χρώση και λύση
προσδιορίζει τον απόλυτο αριθμό των κυττάρων-στόχων. Τα αναμενόμενα αποτελέσματα προσδιορίζονται με τη
χρήση των Stem-Kit Reagents σε επικυρωμένα και τυποποιημένα συστήματα κυτταρομετρίας ροής FC 500 που
διαθέτουν το λογισμικό συστήματος CXP (Έκδοση 2.0) για την ανάλυση δειγμάτων.
ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ
Το Stem-Trol Control Cells εναιωρείται σε ένα ισοτονικό διάλυμα, που περιέχει σταθεροποιητές και BSA. Η
προσδιορισμένη συγκέντρωση κυττάρων (κύτταρα/µL) προκύπτει από πολλαπλές επαναληπτικές αναλύσεις με
χρήση της μεθόδου αναφοράς. Η συγκεκριμένη τιμή αναγράφεται στην ετικέτα του φιαλιδίου.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ
1. Ο χειρισμός όλων των δειγμάτων, των αντιδραστηρίων και των υλικών που έρχονται σε επαφή μαζί τους,
θα πρέπει να γίνεται ως να είναι ικανά να προκαλέσουν λοιμώξεις και για τον λόγο αυτό θα πρέπει να
απορρίπτονται με όλες τις απαραίτητες προφυλάξεις.
2. Ποτέ μην πραγματοποιείτε αναρρόφηση μέσω πιπέτας με το στόμα και να αποφεύγετε την επαφή του
δέρματος και των βλεννογόνων με τα δείγματα ή τα αντιδραστήρια.
3. Μην χρησιμοποιείτε το αντιδραστήριο πέραν της ημερομηνίας λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του
φιαλιδίου.
4. Μην καταψύχετε τα αντιδραστήρια.
5. Μην εκθέτετε τα αντιδραστήρια σε θερμότητα κατά τη φύλαξη ή τη χρήση.
B60231–AE
Απαιτείται ένας θετικός μάρτυρας κυττάρων για την επαλήθευση της απόδοσης του
59 of 128