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3.6 Prueba y verificación de la longitud de onda
La lámpara de arco de mercurio-xenón y el filtro de erbio integrado muestran picos en el espectro
de emisión a longitudes de onda conocidas. Tras ponerse en marcha, el detector espera
5 minutos a que la lámpara de mercurio-xenón se caliente y se estabilice. El detector verifica la
calibración comparando las ubicaciones de estos picos con los datos de calibración
almacenados en la memoria. Si los resultados de esta verificación difieren de la calibración
almacenada en más de ±2,0 nm, el detector muestra un mensaje de error en la verificación de la
longitud de onda. Este mensaje indica que es necesaria una calibración manual de la longitud de
onda. El detector verifica, más que recalibrar, para evitar errores que puedan tener lugar si la
celda de flujo contiene materiales residuales. La calibración requiere una celda de flujo limpia y
una fase móvil transparente. Se puede iniciar una calibración manual de la longitud de onda en
cualquier momento para sustituir los datos de calibración anteriores por nuevos datos.
Nota:
La especificación de exactitud de la longitud de onda combinada del detector es de
±3,0 nm; en cambio, la exactitud de la longitud de onda de cada red de difracción se mantiene en
±2,0 nm.
Cuando el detector funciona constantemente se debe realizar la verificación de la longitud de
onda de forma semanal, bien apagándolo y encendiéndolo de nuevo, o mediante la función
Calibrate Wavelength (Calibrar longitud de onda) de la consola. Las pruebas de verificación
requieren 5 minutos de tiempo de calentamiento de la lámpara para que esta se estabilice.
3.7 Modos de funcionamiento
El detector PREMIER FLR funciona en los modos Single Channel (Monocanal) y Multichannel
(Multicanal), permite el barrido de espectros usando una celda de flujo y proporciona las
funciones Difference (Diferencia) y MaxPlot (Cromatograma de máxima intensidad).
3.7.1 Modo monocanal
El detector utiliza de forma predeterminada el modo Single Channel (Monocanal) y monitoriza un
solo canal para cada par de longitudes de onda de excitación/emisión. Se puede especificar la
longitud de onda de excitación entre 200 y 890 nm en el canal A.
En el modo Single Channel (Monocanal), el detector coloca de forma automática el filtro de
segundo orden para longitudes de onda de excitación de 400 nm y superiores, y lo extrae para
longitudes de onda inferiores a 399 nm. El filtro de segundo orden consiste en un filtro óptico que
impide que la luz UV no deseada llegue a la red de difracción, lo que podría interferir con la
detección de fluorescencia a valores de 400 nm y superiores.
3.7.1.1 Seleccionar la velocidad de adquisición adecuada
Para definir la forma de un pico se necesita un número suficiente de puntos a través del pico. Por
este motivo, la definición entre picos se pierde a velocidades de adquisición muy bajas. El
20 de octubre de 2020, 715006949ES Versión 00
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