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Selección de vidriería
Apéndice A - Selección de vidriería y preparación de
muestras/estandars
Preparación de muestras y estandars
Para asegurar resultados exactos y consistentes, siga
siempre buenas prácticas de laboratorio cuando
prepare muestras y estandars. Trate muestras y
estandars de igual manera durante los procedimientos
de preparación y medición. Use técnicas consistentes
de medición y mezclado y asegúrese de limpiar bien la
vidriería, por dentro y fuera. Material contaminante en
el material de vidrio puede absorber luz y reaccionar
químicamente con los reactivos o estandars.
Selección de vidriería
Para mejores resultados, se debe usar exactamente la
misma celda (cubeta cuadrada o tubo de ensayo) para
cada lectura - blancos, estandars y muestras. Sin
embargo, en la práctica común es inconveniente
limpiar las celdas entre lecturas. Consecuentemente, se
usan diferentes celdas. El operador debe asegurarse
que cada celda usada tenga las mismas características
ópticas.
El tradicional enfoque para aparear celdas en un
instrumento de haz simple es asegurar que la
absorbancia y la reflexión en el vidrio o cuarzo sean
iguales. Esto se lleva a cabo limpiando el interior y
exterior de las celdas a aparear, llenando las celdas con
agua destilada y midiendo la transmitancia (o
absorbancia) cercana a 100%T (0A). La concordancia
entre las lecturas de transmitancia indica el grado de
apareamiento entre celdas.
El apareamiento entre celdas en un instrumento de haz
simple siempre debe ser llevado a cabo a la long. de
onda analítica porque concordancia a una long. de
onda no garantiza concordancia a cualquier otra long.
de onda. Si las celdas seleccionadas no concuerdan, es
preferible encontrar celdas que sí concuerden en lugar
de aplicar correcciones a los datos.
Además de comparar celdas con agua, las celdas deben
llenarse con la solución a medir. Esto provee un control
adicional y advierte al operador de discrepancias en el
paso de luz que no serían detectadas usando agua
únicamente.
Los tubos de ensayo también deben ser comparados y
colocados en el instrumento siempre en el mismo
sentido. Una marca fiducial en el tubo de ensayo le
servirá de ayuda para orientar los tubos de ensayo en el
compartimiento de muestras.
Cubetas cuadradas que han sido cuidadosamente
apareadas dan resultados precisos. Tubos de ensayo
que han sido comparados, cuando usados
apropiadamente, muestran una pequeña desviación del
1-2% entre lecturas.
El paso de luz en los tubos de ensayo no está tan bien
definido como en las cubetas cuadradas. Sin embargo,
construyendo una curva estándar se elimina la
necesidad de conocer con exactitud el paso de luz,
considerando que se usa el mismo paso de luz para
muestras, blanco y estandars.
El rango de longitud de onda varía para los distintos
tipos de celdas, dependiendo del fabricante:
• Vidrio óptico:
• Cuarzo:
• Desechables: Refiérase a las especificaciones del
Nota: Cuando use celdas con pequeña abertura, por
favor siga las siguientes directivas:
• Siempre use celdas enmascaradas.
• Alínee el portaceldas usando las celdas que
pretende usar para medir.
• Use la misma celda (o cubeta) para el blanco y
.
muestras
A - 34
Desde 320 a 360 nm
(dependiendo del fabricante)
hasta 1100 nm
Desde 200 a 230 nm
(dependiendo del fabricante)
hasta 1100 nm
fabricante para asegurarse que
esté trabajando en el rango
recomendado.
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