BD CrystalSpec Guía Para La Utilizacion página 4

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1. Si le volume de l'échantillon est compris entre 2,0 mL et 4,0 mL, introduire l'adaptateur pour échantillon
de petit volume. Si le volume est supérieur à 4,0 mL, l'adaptateur pour échantillon de petit volume n'est
pas nécessaire.
2. Agiter au vortex l'échantillon à analyser et laisser reposer pendant un bref moment si des bulles sont
présentes. Taper doucement sur le tube peut aider à éliminer les bulles. Introduire le tube de l'échantil-
lon à analyser dans le néphélomètre. S'assurer que le tube est introduit aussi loin que possible dans l'in-
strument.
3. Appuyer et relâcher le bouton d'analyse [test tube graphic]. Le résultat sera affiché en même temps que la
mesure de la charge de la pile.
EXEMPLE : Pour un échantillon de McFarland 1,0 et une pile qui nécessite d'être changée, l'affichage
indique :
"1,0 MCFARLAND
4. Ajouter des microorganismes à la préparation de l'échantillon si la mesure est plus faible qu'escompté ou
ajouter de la solution de dilution stérile si la mesure est plus élevée qu'escompté. Mélanger l'échantillon au
vortex et relire.
5. Répéter l'étape 4 jusqu'à ce que la turbidité désirée soit obtenue.
6. Répéter les étapes 2 – 5 (ci-dessus) pour d'autres échantillons.
RESULTATS
Le néphélomètre CrystalSpec affiche les mesures en unités McFarland. Ces mesures représentent la densité
de la suspension et peuvent servir à estimer le taux UFC/mL de la suspension analysée.
LIMITES DE LA METHODE
Le néphélomètre doit être étalonné avec le blanc d'étalonnage CrystalSpec (B) et le standard d'étalonnage
CrystalSpec (S) fournis. L'emploi de tout autre standard entraînera un étalonnage incorrect de l'instrument.
Le standard CrystalSpec ne doit servir qu'à l'étalonnage de cet instrument et ne doit pas servir de témoin
visuel, c'est-à-dire pour une estimation visuelle à un standard de McFarland au sulfate de baryum.
Ne pas utiliser le néphélomètre CrystalSpec pour des mesures au-delà des valeurs McFarland 0,5 – 4,0.
L'instrument ne peut pas mesurer les volumes inférieurs à 2,0 mL.
Des tubes en verre, transparents à fond plat de 16 – 17 mm de diamètre doivent être utilisés pour les
échantillons.
Pour des résultats optimaux il est conseillé d'employer des piles alcalines de 9 V.
Ne pas exposer à la lumière directe du soleil.
CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCE
La reproductibilité de l'instrument a été mesurée au cours d'une période prolongée et au moyen de stan-
dards à des concentrations équivalentes aux valeurs de turbidité McFarland 0,5, 1, 2, 3 et 4. L'erreur pour
chaque estimation a été évaluée à ± 0,1 d'une unité McFarland.
Pour déterminer la précision du néphélomètre CrystalSpec, les comptages de colonies ont été effectués pour des
suspensions de E. coli ATCC 25922 préparées à partir de sérum physiologique. Chaque test a été répété cinq fois et
le nombre moyen de colonies est donné dans le tableau 1.
Tableau 1
McFarland Nombre UFC/mL escompté/10
0,5 1,5
1,0 3,0
2,0 6,0
3,0 9,0
4**0 12,0
*En raison de la difficulté à obtenir de façon exacte la densité McFarland désirée, ces résultats ont été calculés
à partir des lectures du CrystalSpec et en modifiant la valeur UFC/mL observée, comme si chaque dilution
représentait le degré McFarland désiré.
**Le test a été effectué quatre fois pour calculer l'UFC/mL ajusté et le pourcentage du CV (coefficient de varia-
tion).
GARANTIE : Le néphélomètre CrystalSpec est garanti être dépourvu de défaut pendant un an à compter de
la date d'achat.
MAINTENANCE ET DEPANNAGE : Aucune maintenance n'est requise excepté le remplacement de la pile
lorsque l'indicateur de la pile indique "B0" ou qu'un "E" est affiché, ce qui signifie que la pile a une charge
faible.
Si un "E" est affiché, le contrôle interne d'erreur a décelé un problème dû à une utilisation incorrecte, une
pile déchargée ou une défaillance électronique. Si l'étalonnage et/ou le remplacement de la pile ne
remédie pas au problème, contactez votre représentant local de Becton Dickinson.
MATERIEL DISPONIBLE
Nº cat. Description
245009 Néphélomètre CrystalSpec, avec blanc d'étalonnage CrystalSpec et standard d'étalonnage
CrystalSpec, adaptateur pour échantillon de petit volume et pile.
245015 Blanc d'étalonnage CrystalSpec et standard d'étalonnage CrystalSpec, un carton de chaque.
BIBLIOGRAPHIE : voir la rubrique "References" du texte anglais.
CrystalSpec Nephelometer
Bedienungsanleitung
VERWENDUNGSZWECK
Das CrystalSpec Nephelometer ist eine batteriebetriebene, tragbare Vorrichtung zur Messung der Trübung
von Mikrobensuspensionen, die einem McFarland-Standard zwischen 0,5 und 4,0 entspricht. Das Gerät
kann bei allen Laborverfahren verwendet werden, die eine Einstellung der Inokulumdichte innerhalb dieses
Bereichs erfordern.
ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG
Der visuelle Vergleich von Organismen-Suspensionen mit Trübungsstandards ist eine anerkannte
Methode zur Schätzung der Organismen-Dichten. Ein allgemein anerkannter Standard ist der
McFarland-Standard. 1 Ein McFarland-Standard wird durch Zugabe von Bariumchlorid zu wäßriger
Schwefelsäure hergestellt.
Die Dichte der resultierenden Bariumsulfatsuspension kann zur Schätzung der Koloniezahl einer herge-
stellten Suspension verwendet werden; ein Nr. 1 McFarland-Standard entspricht zum Beispiel ungefähr
3 x 10 8 KBE/mL. Andere Standards zur Bestimmung der Dichte wurden ebenfalls verwendet, darunter
2
Suspensionen von Titandioxid und von Latexpartikeln.
Die Bestimmung der Trübung mit Hilfe von Instrumenten beruht auf der Fähigkeit der Teilchen zur Streuung
des Lichts, während sie sich in Suspension befinden. Die Messung dieses gestreuten Lichts wird als
Nephelometrie bezeichnet. 4 Zur Erzielung einer genauen Dichtemessung muß eine zuverlässige
Kalibrierungsmethode verwendet werden.
VERFAHRENSPRINZIP
Das CrystalSpec Nephelometer mißt das Streulicht unter einem Einfallswinkel von 90 °. Es ist ein Gerät mit
Halbleitern, das eine lichtemittierende Diode als Lichtquelle sowie einen Photodioden-Detektor verwendet. Das
Gerät wurde unter Verwendung von Bakteriensuspensionen mit bekannten Konzentrationen (KBE/ml) entwick-
elt. Die Koloniezahlen wurden mit McFarland-Einheiten in Zusammenhang gebracht und das CrystalSpec
Gerät wurde programmiert, die Messung in McFarland-Einheiten anzuzeigen. Die mit dem Gerät geliefer-
ten Kalibrierungsstandards wurden mit dem Ziel entwickelt, eine korrekte Kalibrierung zu garantieren.
Vor der Durchführung von Messungen mit dem CrystalSpec Nephelometer muß das Gerät zunächst mit Hilfe
der gelieferten Standards kalibriert werden. Zur Bestimmung des McFarland-Äquivalents einer
1:34 PM Page 4
B0".
8 UFC* /mL ajusté x 10 8
1,7
3,3
6,5
10,4
13,0
3
4
%CV
11,6
10,7
14,8
8,2
9,9
Deutsch