5 Preparativos antes del inicio
5.8 Aplicación de la muestra
5.8
Aplicación de la muestra
Introducción
La muestra se puede aplicar tanto con la bomba de muestra como con la bomba del
sistema. La bomba de muestra es más práctica, ya que no tiene que lavarse directamente
después de cada aplicación. Además, el volumen de retención es menor cuando se uti-
liza la bomba de muestra. En el Method Wizard, el cuadro de diálogo Sample Loading
contiene los parámetros que determinan la aplicación de muestra.
Nota:
Cebado del tubo de muestra
Antes de una ejecución de filtración en gel, cebe completamente el tubo de muestra
hasta la válvula V5 para reducir la dilución de la muestra. Es especialmente importante
cuando los volúmenes de muestra son pequeños. Cuando utilice técnicas de adsorción,
como las de interacción hidrófoba, afinidad o intercambio iónico, en principio se reco-
mienda cebar el tubo de entrada de muestra hasta la válvula de entrada de muestra.
Uso de la sintonización por
realimentación
La sintonización por realimentación permite mantener el control constante del caudal
y la presión durante la aplicación de muestra, sin tener que intervenir. Es particularmente
útil en las aplicaciones de muestra en las que se espera una alta contrapresión o
cuando la contrapresión fluctúa, por ejemplo, con las muestras viscosas. Con la sintoni-
zación por realimentación, el control del caudal garantiza que la presión nunca supere
la presión máxima de la columna, lo que interrumpiría la aplicación de muestra.
Los valores predeterminados de los parámetros que determinan las propiedades de la
sintonización por realimentación son adecuados en la mayoría de los casos.
Nota:
Para obtener más información sobre los parámetros de sintonización por realimentación,
cómo utilizarlos y optimizarlos, consulte el
en la página
76
Cuando se usa el Method Wizard para crear un método, sólo la bomba
de muestra está habilitada para la aplicación de la muestra.
Si el caudal cae por debajo del valor de MinFlow ajustado, se activará una
Alarm y el sistema entrará en modo Pause. Recomendamos utilizar una
instrucción de observación (Watch) que se active cuando el flujo supere
el valor de MinFlow ajustado. En este caso, se puede continuar con el blo-
que siguiente. Utilice en este bloque un caudal inferior al utilizado antes
de la alarma.
134.
Apéndice A Sintonización por realimentación,
ÄKTApilot Instrucciones de funcionamiento 28959785 AG