Tabla de contenido
Publicidad
Enlaces rápidos
Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD
TM
LSRFortessa
I. Inicio del instrumento.
1. Encienda la UPS y el citómetro del botón verde localizado en la parte superior derecha.
2. Al encender el citómetro deberá de observar en el panel de control de fluidos que se encuentra en el
modo de STNDBY y en la velocidad de LOW.
3. Permita la estabilización del sistema óptico al menos de 30 minutos (Evitar la estabilización puede
afectar la adquisición de la muestra).
TM
4. Cada vez que use el citómetro cheque los niveles de fluidos del tanque del BD FACSFlow
(fluido
envolvente) y del tanque de desechos.
TM
5. Para ello localice primero el tanque del BD FACSFlow
, el cual se encuentra fuera del citómetro y se
localiza en el piso. Relaciónese con sus componentes como se muestra en la figura
1
Publicidad
Tabla de contenido
Manuales relacionados para BD LSRFortessa
Resumen de contenidos para BD LSRFortessa
- Página 1 3. Permita la estabilización del sistema óptico al menos de 30 minutos (Evitar la estabilización puede afectar la adquisición de la muestra). 4. Cada vez que use el citómetro cheque los niveles de fluidos del tanque del BD FACSFlow (fluido envolvente) y del tanque de desechos.
-
Página 2: Desconecte La Línea Del Aire (Línea Verde) Del Tanque Del Bd Facsflow
Movilice el contenedor sosteniéndolo por su asa. 5.2. Desconecte la línea del aire (línea verde) del tanque del BD FACSFlow 5.3. Libere la presión del tanque de la válvula de seguridad. -
Página 3: Destapar El Contenedor Y Vaciar Su Contenido
7. Una vez que ambos tanques hayan sido preparados, en el tanque del BD FACSFlow reconecte la línea del aire (línea verde) y deje que el tanque se presurice por alrededor de cinco minutos, para que la... - Página 4 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 8.1. Si las burbujas de aire son visibles, gentilmente golpear el filtro con la mano para forzar a que estas vayan hacia arriba del filtro. Presionar el conector de la línea del filtro en la parte blanca con un recipiente hasta que el líquido fluya a través de él, tratando de que las burbujas de aire del filtro sean eliminadas.
- Página 5 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 9.1. Para eliminar las burbujas asegúrese que en el SIP se encuentre instalado un tubo falcon de 12 x 75 mm con 1 mL de agua desionizada y en el panel de control de fluidos se encuentre en STNDBY y en la velocidad de flujo HIGH.
- Página 6 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 15. Permita al citómetro conectarse. 16. Una vez conectado el instrumento el escritorio se observará de esta manera 17. El instrumento está listo para su uso.
-
Página 7: Control De Calidad Del Instrumento
1. Proceder a realizar el ajuste del instrumento (Para seleccionar baseline y una nueva configuración se debe estar en la modalidad de administrador, ya que en la forma de operador sólo está activa el ajuste de Check Performance) con las perlas CS&T. Checar la versión del BD FACSDiva software ya que de ello dependerá... - Página 8 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 3. Dar click en la pestaña de Bead Lot Files (cuadro rojo) 4. Escoger los archivos de Bead Lot Files correspondiente, si son de la versión 7.0 u 8.0 se presentan los lotes arriba y si son de la versión 6.0 se presentan los lotes abajo.
-
Página 9: Si Se Está Cargando Archivos De La Versión 6.0 O 7.0, Ambos Software Corren En La Plataforma
6.1. Si se está cargando archivos de la versión 6.0 o 7.0, ambos software corren en la plataforma Windows○ XP. Para guardar los archivos en la Workstation seguir la localización: C:\Program Files\BD FACSDiva Software\CST\Bead Lot. 6.2. Si se está cargando archivos de la versión 8.0, este software corre en la plataforma Windows○... -
Página 10: Temporalmente
Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 7. Para cargar estos lotes de perlas en el módulo de CS&T realizar estos pasos: 7.1. En el BD FACSDiva SW dar click en el menú desplegable Cytometer>CST 7.2. Temporalmente... - Página 11 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 7.4. Aparecerá un cuadro de dialogo donde dar click en Import y seguir la dirección para importar los Bead Lots Files dependiendo de la versión del software como se estableció en el paso 23. Los archivos del lote de perlas se cargaran, al terminar dar OK.
- Página 12 8.2. Preparar al momento las perlas CS&T para ello colocar en un tubo falcon 750 µL de BD FACSFlow de preferencia frío para conservar las fluorescencias, agitar el vial en vortex y adicionar 3 gotas en el tubo por caída libre.
- Página 13 CS&T; para ello colocar en un tubo falcon 350 µL de BD FACSFlow de preferencia frío para conservar las fluorescencias, agitar el vial en vortex y adicionar 1 gota en el tubo por caída libre. Si se usa placa...
- Página 14 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa en el instrumento. Correr a través del panel de control de fluidos pasando del modo STNDBY a RUN de la muestra y colocar en la velocidad de flujo de LOW.
- Página 15 14. Al regresar al BD FACSDiva SW se presentará el recuadro que a continuación se presenta Si todos los ajustes de la configuración a utilizar fueron las adecuadas dar click en Use CST Settings, en caso de que estos no hayan sido los adecuados dar click en Keep Current Settings para que el instrumento regrese a los ajustes realizados antes de haber corrido las CST.
-
Página 16: Compensacion
Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa b. COMPENSACION 1. Para iniciar un experimento en el browser pararse en Administrator 2. Dar click primero en el ícono de folder y darle nombre, colocándose con el ratón en el mismo, según su conveniencia, posteriormente dar click en el ícono del experiment... - Página 17 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 5. Se presentará el siguiente cuadro de dialogo en el cual deberá incluir un tubo no teñido y los 4 colores en donde se realizará la compensación automática. A continuación dar OK.
- Página 18 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 7. Instale el tubo con el control no teñido y mueva el voltaje de FSC y SSC hasta ver el control no teñido y llévelo hasta la región P1, mueva el voltaje de FITC, PE, PerCP y APC si es necesario hasta ver los picos hacia la izquierda como se muestra en el recuadro en rojo.
- Página 19 Guía de mantenimiento y operación estándar para el Citómetro de Flujo BD LSRFortessa 8. En la región P1 seleccionarla con un click derecho y dar la instrucción Apply to all compensation controls. 9. Adquirir el tubo de FITC, PE, PerCP y APC. Una vez terminada la adquisición instalar un tubo de agua desionizada y colocar en STNBY.
-
Página 20: Mantenimiento
1. Realizar la limpieza diaria del instrumento, como se describe en los pasos anteriores. 2. Dejar el tubo con al menos 1 mL de agua desionizada, cerrar el BD FACSDiva SW, dar shutdown de la Workstation y apagar el instrumento del botón verde colocado en la parte superior derecha. - Página 21 3 mL de agua desionizada. De nuevo repetir los pasos 2-6 con esta solución. 9. Una vez terminado este proceso de 90 minutos y con el tanque despresurizado (Desconectar la línea verde del are) volver a instalar el filtro en la línea del fluido envolvente (línea azul). Adicionar BD FACSFlow como en el paso 5.1 del inicio del instrumento.