Tabla de contenido
Publicidad
Problema
Los problemas del instrumento:
No hay tensión o corriente en el
arranque de la carrera
Problemas Resultados 2D:
Estriado vertical de la muestra desde la parte
superior del gel hacia la parte inferior del gel
Rayas horizontales de las proteínas
Las manchas están sesgados o distorsionados
No hay proteínas visibles en gel de segunda
dimensión después de la tinción
Regiones en blanco en el gel de
segunda dimensión
• p22
Solución
Instrumento no está bien conectada a la fuente de alimentación. Asegúrese
de que los cables de alta tensión están conectadas a corregir terminales
+ / - y es seguro. En algunos casos puede ser necesario adaptadores.
Electrodo roto. Compruebe la continuidad del cable con un voltímetro.
La tapa no está bien instalada en banana. Vuelva a colocar la tapa y
comprobar que se ajusta firmemente en su lugar.
Ruptura de la línea principal de alta tensión. Compruebe la continuidad del
cable con un voltímetro.
Franja de IPG no está bien colocado en la superficie del gel. Evitar el alza
de gel de separación durante la carga de las tiras.
Realizar el tratamiento yodoacetamida.
Asegúrese tira IPG uniformemente en contacto con la superficie del gel a lo
largo de toda la longitud de la tira.
La sobrecarga de proteínas.
Mala preparación de la muestra.
La insuficiencia de focalización.
Mal contacto entre la tira IPG y el gel de segunda dimensión.
Los geles correr muy rápido-la migración irregular.
Superponer el gel de resolución con agua saturada de n-butanol antes de la
polimerización comienza a evitar la formación de un gel de superficie desigual.
Polimerización de gel irregular o la formación de gradiente. Ver echando
problemas para obtener más apoyo.
Tira IPG no está bien colocado en la superficie del gel. Evitar el alza de gel
de separación durante la carga de las tiras.
La entrada de muestras en el gel de segunda dimensión se ejecuta en un
entorno demasiado alto poder. Ejecutar los geles en condiciones de plazo
recomendado.
Las burbujas presentes en gel de segunda dimensión se distorsionará la
migración de lugar.
Cantidad muy poca carga para el método de detección. Aumentar la carga
de proteínas o probar un método de tinción más sensible.
Demasiado poco muestra aplicada a gel de primera dimensión. Ver la
concentración de proteínas de la muestra.
Equilibrio pasos demasiado corto o demasiado largo. Realice cada paso de
equilibrio durante 10-15 minutos.
Tris, sales, y SDS pueden producir alteraciones en la posición de enfoque
de las proteínas en la primera dimensión. Reducir o eliminar estos compues-
tos a partir de la primera dimensión.
Las burbujas entre la tira y el gel de segunda dimensión.
Publicidad
Tabla de contenido
