Acrilamida Preparación De Gel - Hoefer SE400 Manual Del Usuario

Nota: El Apéndice A en la
página 30, enumera las
recetas para el sistema de gel
de Laemmli.
2.2 Acrilamida preparación de gel
Tabla 1. Monómero aproximado volumen de solución
requerida para un solo gel
Modelo 0,75
SE400 15 ml
SE410 23 ml
2.2.1 Resolución de gel de
1
Preparar la solución de monómero y verter el gel.
Preparar la cantidad necesaria de solución de
monómero, desairear, y añadir el iniciador y el cataliza-
dor justo antes de verter el gel.
2
Pipetear la solución en una esquina del sándwich,
teniendo cuidado de no introducir burbujas de aire. Vea
a continuación el nivel de solución adecuada:
No gel de apilamiento (sistema continuo). Solución
de llenado hasta justo debajo de la parte superior del
borde de la placa superior. Si las burbujas se encuen-
tran atrapados, retire con una pipeta o una jeringa.
Introducir un peine (con un ligero ángulo) en cada
sándwich, teniendo cuidado de no atrapar burbujas de
aire debajo de los dientes.
2-gel de sándwich. Pipetear la solución en ambos
emparedados, llenando cada uno al mismo nivel por
debajo del borde con muescas.
Gel de apilamiento. Completa solución a 3-4 cm por
debajo de la parte superior de la placa de vidrio. Esta
altura permite 1 cm de gel de apilamiento por debajo
de los pozos. Verter el gel y aplicar una capa super-
puesta (véase el paso 3). Después el gel se establece,
preparar el gel de apilamiento como se describe en la
sección siguiente.
2-D electroforesis (sistema discontinuo). Para la segunda
dimensión de gel de resolución, solución de relleno a
~1,0 cm por debajo de la parte superior de la placa
de vidrio (dejar espacio adicional para un gel de apila-
miento, si es necesario). Un centímetro permite sufici-
ente espacio para la tira IPG dimensión de primera o
tubo de gel de agarosa y un sello. (Durante la transfer-
encia, tenga cuidado para evitar el atrapamiento de aire
entre el tubo de gel y el gel de losa; sellar el tubo de gel
en el lugar con agarosa en tampón de electroforesis.)
Gel de espesor (mm)
1,00
23 ml
34 ml
1,5
30 ml
45 ml
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