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Funcionamiento anómalo y subsanación
C. Proceso inverso lento
Proceso que usa un protocolo de limpieza modificado para un período igual al tiempo requerido para procesar
adicionalmente el tejido
formalina al usar una programación adecuada para el tamaño y naturaleza de la muestra
Tipo de muestra y duración de
El proceso de inversión larga es muy suave para el tejido. Es la mejor opción cuando se dispone del tiempo
necesario.
7. Tejido afectado por formalina durante el aclarado o infiltración de parafina
Este problema puede producirse si una válvula con fugas permite que fluya formalina hacia el baño de
parafina. Si observa este problema, póngase en contacto con el servicio de atención al cliente y solicite
que se revise su instrumento.
La contaminación por formalina se caracteriza por un tono azulado de los núcleos, una pérdida de los
detalles de la cromatina, la contracción del núcleo, una eosinofilia variable y la inflamación o contracción
del citoplasma.
Primero funda los bloques, retire el exceso de parafina y después coloque las muestras en casetes nuevos.
Esto minimiza la contaminación con parafina de los reactivos de procesamiento. A continuación, someta los
bloques al proceso inverso de cualquiera de los métodos para el problema 6. Después de esto, sumerja en una
disolución de recuperación de Tris-HCl a pH alto (p. ej., Disolución de recuperación de epítopo Leica BOND 2)
durante 2–12 horas a temperatura ambiente.
Este tratamiento mejora las cualidades de tinción de la H&E (hematoxilina y eosina), las cualidades de
corte del tejido y la cohesión de la sección. Es poco probable que los detalles del núcleo y la inflamación
y definición del citoplasma mejoren.
8. Tejido procesado de modo insuficiente fijado inadecuadamente
Una posible solución es invertir el proceso del tejido lentamente
aplicar fijación con formalina adicional, después reprocesar al usar una programación adecuada para el
tamaño y naturaleza de la muestra
El tejido sin fijar o con una mala fijación se daña durante el procesado. El etanol y las temperaturas altas
ejercen un efecto fijador diferente que el del formaldehído. Como resultado, los bloques son más susceptibles
de endurecerse y contraerse. Si además están poco procesados, pueden ser inutilizables.
Protocolo de limpieza inverso rápido
Paso
Tipo de reactivo
1
Disolventes limpiadores
2
Etanol limpiador
Tiempo de procesamiento:
180
(→ p. 181 – Protocolo de limpieza inverso
protocolo).
(→ p. 159 – 10.2.1 Tipo de muestra y duración de
Tiempo
(min)
12
6
18
lento). Después, reprocese a partir de
(→ p. 180 – C. Proceso inverso
Temp (°C)
P/V
65
Ambiente Encendido
55
Ambiente Encendido
(→ p. 159 – 10.2.1
lento),
protocolo).
Agitador
Tiempo de
goteo (s)
10
10
Versión 1.1, Revisión B
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