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Optimización del detector
Optimización del detector en relación con el sistema
En el caso de una molécula concreta, es posible optimizar la banda estrecha en
términos de la sensibilidad. Al aumentar la anchura de banda, no solo se
reduce la señal, sino también el ruido, con lo existirá un punto óptimo para
alcanzar la mejor señal/ruido. Como guía aproximada, este punto óptimo suele
situarse cerca de la anchura de banda natural a media altura de la banda de
absorción en el espectro UV. En el ejemplo del ácido anísico, es 30 nm.
La longitud de onda analítica suele fijarse generalmente en un máximo de la
longitud de onda para aumentar la sensibilidad correspondiente a dicha
molécula. El detector es lineal hasta 2 AU y más allá en el caso de muchas apli-
caciones. Esto ofrece un rango lineal amplio para la concentración. En los
análisis de concentración elevada, el rango de concentración lineal puede
ampliarse si se fija una longitud de onda con una baja absorbancia como un
mínimo de la longitud de onda o se utiliza una anchura de banda más amplia,
lo que generalmente incluye valores de absorbancia más bajos. La utilización
de mínimos y máximos de la longitud de onda para la cuantificación se
remonta a los detectores UV convencionales, los cuales necesitaban evitar
pendientes acusadas en el espectro debido a las tolerancias mecánicas que se
generaban al mover las redes de difracción. Los detectores basados en diodos
no presentan esta limitación. Sin embargo, por convención, se escogen los
máximos y mínimos con preferencia a otras partes del espectro.
La anchura de banda de referencia se suele establecer en una región del espectro
UV en la que el analito no tenga absorbancia. Esto se ilustra en el espectro del
ácido anísico que se muestra en la
típico de muchas moléculas pequeñas que contienen un cromóforo UV. Para obte-
ner los mejores resultados, se ha fijado la referencia en una banda amplia lo más
próxima posible a la longitud de onda de la señal, pero en una región con absor-
bancia cero. Se suelen utilizar anchuras de banda de referencia de entre 60 nm y
100 nm. La referencia predeterminada es 360 nm con una anchura de banda de
100 nm. Se utiliza una anchura de banda amplia porque se reduce el ruido de la
señal de referencia (según la teoría estadística, el error, es decir, el ruido en este
caso, se reduce por la raíz cuadrada del número de determinaciones). Es impor-
tante que la anchura de banda de referencia no se amplíe a una parte del espectro
que tenga absorbancia, ya que entonces se reduciría la señal resultante, así como
la sensibilidad. La utilización de una longitud de onda de referencia puede ayudar
a reducir la deriva o la desviación en el cromatograma que se originan como con-
secuencia de los cambios en el índice de refracción. Estos cambios se deben a la
fluctuación de la temperatura ambiente o a la operación de gradiente. Es posible
probar fácilmente el efecto de una señal de referencia. Para ello, es necesario con-
figurar dos señales idénticas, una con una señal de referencia y otra sin una señal
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Figura 52
Manual de usuario del detector de diodos Agilent Serie 1200 Infinity
en la página 157. Este espectro es
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