4
Utilización del detector de fluorescencia
Desarrollo de métodos
Procedimiento III: Realización de un único análisis con una combinación
de detector de diodos y detector de fluorescencia
Para la mayoría de los compuestos orgánicos, los espectros UV de los detecto-
res de diodos son prácticamente idénticos a los espectros de excitación de
fluorescencia. Las diferencias espectrales se deben a características específi-
cas del detector, como la resolución espectral o las fuentes de luz.
En la práctica, la combinación de un detector de diodos con un detector de
fluorescencia en serie proporciona el conjunto completo de datos necesarios
para conseguir longitudes de onda óptimas de excitación y de emisión, para
una serie de compuestos en un único análisis. El detector de diodos permite
conocer los espectros UV/visible/de excitación, mientras que el detector de
fluorescencia está configurado para adquirir espectros de emisión con una
longitud de onda de excitación fija en el rango UV bajo.
Este ejemplo se ha tomado de un control de calidad de carbamatos. Las mues-
tras se analizaron en busca de las impurezas: 2,3-diaminofenacina (DAP) y
2-amino-3-hidroxifenacina (AHP). Las muestras de referencia de DAP y AHP
se analizaron con detectores de diodos y de fluorescencia. La
página 91 muestra los espectros obtenidos con ambos detectores para la DAP.
El espectro de excitación de la DAP es muy similar al de absorción UV del
detector de diodos. La
ria del método a una muestra de carbamato y a una mezcla pura de DAP y AHP
a modo de referencia. La columna se sobrecargó con el carbamato no fluores-
cente (éster metílico del ácido 2-bencimidazol-carbámico/MBC) para observar
las impurezas conocidas (AHP y DAP).
90
Tabla
en la página 92 muestra la aplicación satisfacto-
Manual de usuario del detector de fluorescencia Agilent 1260
Tabla
en la