Método Diferencial De Tres Partes - Abaxis VetScan HM5 Manual Del Usuario

El recuento correcto (o diferenciación) de células requiere que las células pasen de una en una a través
de la abertura. Para ayudar a que esto ocurra, las muestras de sangre debe diluirse; de lo contrario, las
concentraciones de células serían demasiado altas.
células contadas
En los casos en los que el recuento celular sobrepasa el intervalo lineal, se recomienda una predilución
externa de la muestra.
B.2.2 Método diferencial de tres partes
Para realizar un recuento diferencial de leucocitos de tres partes, hay que lisar primero los hematíes, ya
que la sangre normal suele tener una concentración 1000 veces mayor de hematíes que de leucocitos,
e interferirán en el recuento de leucocitos si se dejan intactos. El lisado también libera la hemoglobina
almacenada en los hematíes para su análisis directo en la solución.
Por ello, se utiliza un reactivo hemolizante (lisante) para disolver las membranas celulares, destruyendo
así los hematíes y creando una solución compleja adecuada para la fotometría de la hemoglobina y el
recuento de leucocitos.
La siguiente figura muestra los cambios en las características de las células sanguíneas que tienen lugar
durante la hemólisis con diferencial de tres partes.
situación ideal
coincidencia de error
situación real
células en dilución
HEM y PLT linfocito
hemolis con diferencial de tres partes
Principios operativos
Aunque se utilice sangre diluida, en casos de
concentraciones extremadamente altas (como
leucemia), la densidad de leucocitos puede ser
100 veces mayor de lo normal, lo que hace que
pasen 2 o más células a la vez por la abertura y
provoquen un impulso en lugar de dos (o más).
Esto se denomina coincidencia y ocasiona un
recuento no lineal de células. En este caso
aparecerán los indicadores m, M y N.
El intervalo de linealidad de los leucocitos es de
100 x 10 células/l.
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monocito granulocito
B-3