Guía del sistema de secuenciación NovaSeq 6000
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Prepare la celda de flujo y la plataforma.
10 Prepare la mezcla maestra de ExAmp.
11 Cargue la mezcla de ExAmp o de bibliotecas en la celda de flujo.
12 Cargue un tubo de bibliotecas vacío en la posición n.º 8 del cartucho de grupo.
Métodos
Asegúrese de que dispone de los consumibles y equipos necesarios. Consulte
u
proporcionados por el usuario en la página
Asegúrese de que el instrumento está encendido y tiene suficiente espacio de almacenamiento para el
u
experimento. Consulte la sección
Asegúrese de que se termina el lavado automático posterior al experimento en ambos lados del
u
instrumento antes de iniciar el paso 6 del flujo de trabajo (consulte la sección
de NovaSeq Xp en la página
Compruebe siempre la etiqueta cuando prepare consumibles para garantizar la compatibilidad entre
u
componentes. No mezcle los componentes de SP, S1, S2 y S4 ni los componentes de celdas de flujo de
dos carriles y cuatro carriles, en un lado del instrumento.
Siga las instrucciones en el orden mostrado, con los volúmenes, las temperaturas y las duraciones que
u
se especifiquen.
Cuando no esté mezclando de manera activa, meta todos los reactivos y bibliotecas en hielo.
u
A menos que se haya especificado un punto de parada en el protocolo, continúe inmediatamente con el
u
siguiente paso.
Para iniciar correctamente la secuenciación de una celda de flujo de dos carriles, ambos carriles deberán
u
estar llenos. Para iniciar correctamente la secuenciación de una celda de flujo de cuatro carriles, uno de
los carriles podrá estar parcialmente lleno o vacío.
Las causas más comunes de las variaciones en los resultados cuando se mezclan los reactivos ExAmp
u
manualmente son la entrega imprecisa de volúmenes de componentes ExAmp y una mezcla insuficiente.
No mezcle menos de lo normal.
NOTA
Inicie el experimento de secuenciación inmediatamente después de cargar las bibliotecas en la celda de
flujo, preferiblemente, antes de que transcurran 30 minutos.
Directrices para las bibliotecas
Todas las instrucciones se aplican a los métodos de preparación de bibliotecas compatibles y dan por hecho
un tamaño de fragmento normal para aplicaciones de NovaSeq 6000 compatibles.
Para obtener unos resultados óptimos, agrupe y desnaturalice las bibliotecas inmediatamente antes de
u
la secuenciación.
Para el flujo de trabajo de NovaSeq Xp, no prepare la mezcla maestra de ExAmp hasta que esté listo
para iniciar la secuenciación.
Diluya la biblioteca a una concentración de carga adecuada para la aplicación. Una concentración de
u
carga que sea demasiado baja o demasiado alta afectará de manera negativa al porcentaje de grupos
N.º de documento 1000000019358 v11 ESP N.º de material 20023471
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
27.
Gestión del proceso en la página
38).
Consumibles y equipos
9.
Resumen de flujo de trabajo
39