Manuales relacionados para Leica TCS SP5
Resumen de contenidos para Leica TCS SP5
- Página 1 INSTRUCCIONES GENERALES DE USO MICROSCOPIO CONFOCAL LEICA LCS SP5 Febrero de 2009...
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Página 2: Introduccion: Caracteristicas Generales
CONFOCAL LEICA LCS SP5 INTRODUCCION: CARACTERISTICAS GENERALES Láseres que tenemos en el microscopio confocal LEICA TCS SP5 Diodo Ultravioleta con una frecuencia de 405 nm para fluorocromos como el DAPI Láser de Argón que dan frecuencias de 458 nm, 476 nm, 488 nm, 496 nm, 514 nm. -
Página 3: Puesta En Servicio Del Sistema
Figura 1: Encendido de la Workstation TCS 2. Iniciar la sesión. El nombre de usuario estándar para el sistema TCS SP5 de Leica es "TCS_User". No existe una contraseña estándar. El software LAS AF se basa en la administración del usuario del sistema operativo, por lo que también se crean archivos propios del software... - Página 4 4. Encender ahora el escáner TCS SP5 en la consola de control.(figura 3). Figura 3: Encienda el escáner 5. Encender el láser en la consola de control. A continuación se ponen en marcha las fuentes de alimentación y el ventilador del sistema.
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Página 5: Ejecución Del Programa Las Af
LAS AF en el escritorio. Figura 6: Icono LAS AF en el escritorio 2. Seleccionar si desea trabajar con el sistema TCS SP5 en modo resonante o no resonante. Figura 7: Modo de servicio resonante o no resonante 3. -
Página 6: Estructura De La Interfaz De Usuario
3. ESTRUCTURA DE LA INTERFAZ DE USUARIO 3.1 Generalidades de la estructura de la interfaz de usuario La interfaz de usuario del LAS AF se divide en cinco campos: Figura 10: Interfaz de usuario de LAS AF 1 Barra de menús: Aquí encontrarás los diferentes menús para activar funciones 2 Símbolo de flecha: Etapas de trabajo para cada una de las funciones. -
Página 7: Trabajo Con El Microscopio Confocal
4. TRABAJO CON EL MICROSCOPIO CONFOCAL 4.1 Colocación y enfoque de la muestra 1) Elegir objetivo (en la pantalla aparece una opción) y añadir gota de aceite si la necesitase el objetivo. El de 10x no necesita es seco. 2) Colocar la muestra inmediatamente para que el aceite no se escurra. NOTA IMPORTANTE: Al encender el microscopio el objetivo siempre está... -
Página 8: Aplicación De Los Settings
4.2.2 Aplicación de los settings Vamos al menú Adquire ⇒ En el submenú Experiments ⇒Pulsamos Open, se abre una pantalla de busqueda ⇒Buscamos en D:\ Images\ nuestro laboratorio \ archivo.lif que deseemos ⇒Pulsamos abrir. Una vez abierto el archivo elegimos la imagen que deseemos y que en la sesión inicial decidimos las mejores condiciones para su observación. - Página 9 Una vez enfocado con el microscopio óptico. Se aplican los setting que teníamos guardados de la primera sesión. EN RESUMEN: 1) Pulsar “Configuración” ⇒ “Laser” ⇒ activar todos necesarios para la observación y subir el láser argón al 20% si este se utiliza. 2) Pulsar “Acquire”...
- Página 10 2) Pulsar “Live” Se comprueba el enfoque y la ganancia, comprobando que no está saturada la visión (demasiados puntos de color azul), utilizando los botones giratorios Modificar ganancia (Smart Gain) Enfocar moviendo (Z position). También se controlará el fondo de la imagen con Smart Offset hasta que comience a aparecer el fondo verde.
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Página 11: Se Pueden Realizar Varias Opciones
5. SE PUEDEN REALIZAR VARIAS OPCIONES: 5.1 Tomar una fotografía general: Seleccionamos la resolución deseada. Recomendada 1024*1024 Si la imagen está “sucia” se cambiará “frame average”, una, dos, tres, cuatro…pasadas Pulsar “Capture image” Si en los settings se ha establecido que la captura se haga de manera secuencial y dentro de esa manera se ha seleccionado de la manera between frames deberá... - Página 12 OBSERVACIÓN: Si estoy al límite de resolución del objetivo da igual coger el formato de la imagen, sólo consigo coger más puntos, porque el objetivo no es capaz de diferenciar más puntos. Sólo aumento el tamaño de la imagen. Ajustamos ganancia, enfoque. Pulsamos Stop Si queremos tomar foto de ese zoom entonces cambiar “resolution”, “frame average”...
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Página 13: Otras Aplicaciones
Nota1: para todos los objetivos y resolución 1024x1024 el píxel de zoom debe ser ≥ 69-70 Nota2: Cada vez que se quiera realizar una foto de un campo de muestra diferente se recomienda volver a poner condiciones de búsqueda: “zoom”=1, “resolution”=512x512 y “frame average”... -
Página 14: Desconexión Del Sistema
Figura 11: Consola de control en la posición "O". A continuación, desconectar el interruptor del escáner TCS SP5 (Figura 11, posición 4) La marcha en inercia de la refrigeración del láser sirve para la seguridad de servicio del sistema TCS SP5. -
Página 15: Cuando Surgen Problemas
EN RESUMEN C) Apagado del Confocal 1) Pulsar “Configuración” ⇒ “Laser” ⇒ desactivar todos y bajar el láser de argón al 0% 2) Cerrar programa, si fuese necesario también apagar la lámpara de mercurio. 3) Girar llave a OFF y pulsar “Laser-Power” hacerlo de forma pausada, no inmediatamente para refrigerar un rato los láseres. -
Página 16: Otros Problemas Que Pueden Surgir
9. OTROS PROBLEMAS QUE PUEDEN SURGIR: 9.1 Si cuando aplicamos settings y algún láser no tiene la potencia suficiente, es decir, que haya que aumentar de una manera desproporcionada la intensidad del láser, ( y creemos que nuestra muestra está bien..) una de las posibilidades es que la AOBS no esté...