Qué Es Lo Mejor Para Analizar Mis Muestras, Esi, H-Esi O Apci; Uso De Esi O H-Esi - Thermo Fisher Scientific TSQ Serie Manual De Puesta En Marcha

1
Introducción
¿Qué es lo mejor para analizar mis muestras, ESI, H-ESI o APCI?
¿Qué es lo mejor para analizar mis muestras, ESI, H-ESI o APCI?
El espectrómetro de masas TSQ se puede hacer funcionar en uno de los tres modos de ionización a
presión atmosférica:
• Ionización por electrospray (ESI)
• Ionización por electrospray calentado (H-ESI)
• Ionización química a presión atmosférica (APCI)
En general, ESI o H-ESI son la opción más apropiada para el análisis de compuestos polares como
aminas, péptidos y proteínas; APCI es la mejor solución analítica para compuestos no polares como los
esteroides.
Los iones de la muestra pueden llevar una sola carga o varias cargas. El número de cargas transportadas por
los iones de la muestra depende de la estructura del analito de interés, la fase móvil y el modo de
ionización.

Uso de ESI o H-ESI

Los modos ESI y H-ESI suelen producir un espectro de masas consistente de iones de carga única, pero la
carga depende de la estructura del analito y del disolvente. Cuando se producen iones con varias cargas, el
espectro de masas resultante se puede transformar matemáticamente para expresar el peso molecular de la
muestra.
Los modos ESI y H-ESI transfieren los iones de la disolución a la fase gaseosa. ESI y H-ESI pueden
analizar cualquier muestra previamente no apta para análisis de masas (por ejemplo, compuestos
termolábiles o de peso molecular elevado). Puede utilizar ESI y H-ESI para analizar cualquier compuesto
polar que origine un ión preformado en la disolución. El término ión preformado puede incluir iones
aductos. Por ejemplo, puede analizar polietilenglicoles de una disolución con acetato amónico por la
formación de aductos entre los iones NH
ESI y H-ESI, el sistema TSQ puede analizar compuestos con pesos moleculares mayores que 100000 u
debido a las cargas múltiples. ESI y H-ESI son particularmente útiles para el análisis de masas de
compuestos polares, lo que incluye polímeros biológicos (como proteínas, péptidos, glicoproteínas y
nucleótidos), fármacos y sus metabolitos, y polímeros industriales.
Los modos ESI y H-ESI se pueden utilizar en los dos modos de polaridad de iones, positiva y negativa.
La polaridad de los iones preformados de la disolución determina el modo de polaridad de iones: las
moléculas ácidas forman iones negativos en una disolución de pH elevado y las moléculas básicas forman
iones positivos en una disolución de pH bajo. Para generar iones positivos se utiliza una aguja de
electronebulización positivamente cargada, mientras que para generar iones negativos se emplea una aguja
negativamente cargada.
El caudal del LC al espectrómetro de masas se puede variar desde menos de 1 μL/min (mediante una fuente de
iones de nanospray) hasta 1000 μL/min (con fuentes ESI y H-ESI estándar). Vea la
proteínas o péptidos con mayor peso molecular, el espectro de masas resultante característico consta de una
serie de picos correspondientes a una distribución de iones de analito con múltiples cargas.
Los procesos de ESI y H-ESI sufren la influencia de factores como el tamaño de gotícula, la carga
superficial, la tensión superficial del líquido, la volatilidad de disolvente y la intensidad de solvatación de
los iones. Las gotículas de gran tamaño con tensión superficial alta, volatilidad baja, solvatación de iones
intensa, carga superficial baja y conductividad alta impiden la electronebulización adecuada. (En ESI y
H-ESI, el tampón y la capacidad tamponadora afectan sobremanera a la sensibilidad, por lo que son
variables que hay que elegir con cuidado).
2 Manual de Puesta en Marcha de la serie TSQ
+
de la disolución y los átomos de oxígeno del polímero. Con
4
Tabla 4. En el caso de
Thermo Scientific