Uso De La Formamida - Hitachi ABI PRISM 3100 Manual De Inicio Rápido

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Uso de la formamida

A-4 Preparación de la formamida
Para comenzar la purificación y medir la conductividad:
Paso
Acción
8
Extraiga una parte alícuota de la mezcla y mida la conductividad a temperatura
ambiente.
9
Aclare la célula de conductividad con agua destilada.
10
Si la conductividad es...
>5 µS/cm
<5 µS/cm
Nota Si la conductividad no es <5 µS/cm después de unas 4,5 h de mezclado,
repita todo el procedimiento utilizando un nuevo lote de formamida y nueva resina.
Nota Una formamida inicial con una conductividad menor y una pureza mayor se
desioniza de manera más eficaz.
Para completar la purificación de la formamida desionizada:
Paso
Acción
1
Filtre al vacío la formamida desionizada utilizando un filtro de nylon o teflón de 0,2
o 0,4 µm.
2
Mida el volumen final de formamida desionizada.
3
Añada el volumen necesario de EDTA 200-mM a la formamida desionizada para
conseguir una concentración final de EDTA de aproximadamente 0,3-mM.
Nota Después de añadir el EDTA, la conductividad final de la formulación
aumenta a aproximadamente 30 µS/cm. Utilice la siguiente ecuación para calcular
el volumen de EDTA que es necesario añadir.
V
= 1,5 V
EDTA (µl)
Donde,
µ
= volumen de EDTA para añadir en microlitros
VEDTA(
l)
V
= volumen medido de formamida en mililitros
FORM(ml)
Cálculo de la muestra con un volumen final de 90-ml de formamida:
V
= 1,5 x 90 = 135 µl
EDTA(µl)
4
Transfiera inmediatamente partes alícuotas de la formamida a tubos de propileno
más pequeños y consérvelos a una temperatura de -15 a -20 °C durante un
máximo de 6 meses.
Cuando todo esté preparado para su uso, descongele y utilice completamente un
tubo cada vez antes de abrir y exponer otro tubo. Conserve los tubos a 4 °C durante
el día para un uso intermitente. En caso contrario, vuelva a congelarlos.
Haga lo siguiente...
Vuelva al paso 7 y agite la mezcla durante
30 min más.
Continúe en "Para completar la purificación de
la formamida desionizada:" más adelante.
Form(ml)
(continuación)

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