2 Preparar el sistema para su uso
Un flujo de trabajo habitual de cribado de columnas incluye las acciones
siguientes:
•
Crear un método para cada columna que se desea evaluar.
•
En cada método, crear un gradiente formado por dos o tres inyecciones.
Especificar la primera inyección para equilibrar la columna, y la
segunda y la tercera inyecciones para inyectar la muestra.
•
Ejecutar el gradiente durante 5 minutos, comenzando con una mezcla de
fase móvil de un 5% de eluyente orgánico y un 95% de CO
con un máximo de 40% de eluyente orgánico y un 60% de CO
•
Dejar pasar eluyente orgánico al 40% durante al menos un minuto para
lavar la columna.
Recomendación:
no consigue la separación, se pueden utilizar eluyentes más suaves,
como etanol o isopropanol.
•
Configurar los parámetros del sistema:
•
Caudal desde 2,5 mL/minuto para una columna de 3,0 × 100 mm de
diámetro interno y partículas de menos de 2 μm.
Excepción:
partículas más pequeños, utilizar caudales más bajos.
•
Temperatura de la columna por encima del mínimo (31 °C).
•
Presión del sistema superior a 9997 kPa (100 bar, 1450 psi).
Indicación:
(120 bar, 1740 psi).
•
Presión del ABPR configurada en 13 789 kPa (138 bar, 2000 psi)
Después de revisar los datos y elegir la columna idónea para la aplicación, se
puede ejecutar un método isocrático o un gradiente poco pronunciado para
optimizar aún más el método.
Apagar el sistema ACQUITY UPC
Para apagar el sistema ACQUITY UPC
1.
Bombear la mezcla de fase móvil inicial por la columna.
Resultado:
necesario para una buena reproducibilidad del tiempo de retención.
40
20 de junio de 2014, 715004521ES Rev. B
comenzar con metanol como coeluyente. Si la columna
para columnas con diámetros internos y tamaños de
una buena presión inicial del sistema es 11 996 kPa
de este modo se conservará en la columna el equilibrio
2
2
durante menos de 24 horas:
, y terminando
2
.
2