Métodos Predefinidos - GE ÄKTA avan Manual De Instrucciones

5 Crear un método
5.1 Guía para la creación de métodos
5.1.2 Métodos predefinidos
5.1.2 Métodos predefinidos
Los métodos predefinidos disponibles se describen en la siguiente tabla.
Método
Affinity Chroma-
tography (AC)
Anion Exchan-
ge Chromato-
graphy (AIEX)
Cation Exchan-
ge Chromato-
graphy (CIEX)
Chromatofocu-
sing (CF)
Column CIP
Column Perfor-
mance Test
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Descripción
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, la proteína de in-
terés se adsorbe en el ligando de la columna. Luego de un lavado
para quitar muestras sueltas, se realiza una elución con una solu-
ción amortiguadora que contenga un competidor que desplace
la proteína de interés o cambiando el pH o la fuerza iónica. Final-
mente, se vuelve a equilibrar la columna con la solución amorti-
guadora de inicio.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, las proteínas con
carga negativa se adsorben en el ligando de la columna. Luego
de un lavado para quitar muestras sueltas, se realiza una elución
utilizando un gradiente con una concentración salina en aumento
(p. ej., de NaCl). Finalmente, se lava la columna y se la vuelve a
equilibrar con la solución amortiguadora de inicio.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, las proteínas con
carga positiva se adsorben en el ligando de la columna. Luego
de un lavado para quitar muestras sueltas, se realiza una elución
utilizando un gradiente con una concentración salina en aumento
(p. ej., de NaCl). Finalmente, se lava la columna y se la vuelve a
equilibrar con la solución amortiguadora de inicio.
Luego del equilibrio y la aplicación de muestra, se realiza una
elución utilizando un gradiente de pH. Las proteínas se separan
y eluyen según sus puntos isoeléctricos. Finalmente, se vuelve a
equilibrar la columna.
Sólo disponible para ÄKTA avant 25.
Se llena la columna con una solución de limpieza. Seleccione las
posiciones de entrada. Ingrese la identificación, el volumen, el
caudal y el tiempo de incubación de la solución. Si se agregan
pasos, se pueden utilizar varias soluciones de limpieza. Están
disponibles las sugerencias para los pasos de limpieza para dis-
tintos tipos de columnas.
Después de equilibrar la columna, la muestra se inyecta y se eluye
isocráticamente. Debería utilizarse una muestra no absorbente
como acetona o sal. Después de la ejecución, calcule el rendimien-
to de la columna en el módulo de Evaluación. La eficacia de la
columna se determina por la altura equivalente por plato teórico
(HETP), y el factor asimetría del pico (A
en la columna de registro.
). El resultado se registra
s
Comienzo con ÄKTA avant 29-0351-83 AA