Tabla de contenido
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5.1.3
Fases predefinidas
En la siguiente tabla, se describen las fases predefinidas disponibles en los métodos
predefinidos y en la Phase Library.
Fase
Method Settings
Equilibration
Sample Applica-
tion
Column Wash
Elution
Column Prepara-
tion
Column CIP
System Prepara-
tion
System CIP
Column Perfor-
mance Test
Comienzo con ÄKTA avant 29-0351-83 AA
Descripción
La primera fase obligatoria en cualquier método. Define los
parámetros comunes que se utilizarán en las fases subsiguien-
tes.
Equilibra la columna antes de la purificación, o vuelve a equili-
brarla luego de la purificación.
Aplica la muestra a la columna. Define la técnica de aplicación
de la muestra, el volumen de la muestra y el manejo de la técni-
ca de flujo.
Lava las muestras sueltas luego de la aplicación de muestra o
quita las proteínas fuertemente ligadas luego de la elución.
Eluye la muestra de la columna. Define los parámetros para la
elución y la configuraciones del fraccionamiento.
Prepara la columna para el uso quitando la solución de almace-
namiento y equilibrando la columna. Si se agregan pasos, se
pueden utilizar varias soluciones de preparación de forma se-
cuencial.
Limpia la columna luego de las ejecuciones de purificación en-
juagándola con una solución de limpieza para quitar las proteí-
nas ligadas no especificas. Si se agregan pasos, se pueden uti-
lizar varias soluciones de limpieza de forma secuencial.
Prepara el sistema antes de una ejecución quitando la solución
de almacenamiento y llenando el sistema y las entradas con
solución amortiguadora. En cada fase utiliza una solución de
preparación.
Limpia el sistema luego de las ejecuciones de purificación enjua-
gando el sistema con una solución de limpieza. En cada fase
utiliza una solución de limpieza.
Prueba la eficacia de la columna llena según la altura equivalen-
te por plato teórico (HETP) y el factor asimetría del pico (A
5 Crear un método
5.1 Guía para la creación de métodos
5.1.3 Fases predefinidas
).
s
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