Nota: Cada 21 × 26 cm de
papel de transferencia absorberá
aproximadamente 50 ml de
tampón de transferencia. Cada
papel de transferencia 14 × 16 cm
absorberá aproximadamente 20 ml
de tampón.
Nota: Si no se utiliza papel
secante Hoefer, piezas adicionales
pueden ser necesarios para lograr
los resultados deseados.
Nota: Siempre use guantes al
manipular las membranas para
evitar dejar huellas dactilares.
4
Preparar el papel secante
Para cada gel, corte por lo menos 6 trozos de papel
secante del mismo tamaño que el gel o ligeramente
más pequeño.
Medir el espesor o el número de capas de papel
secante de acuerdo con la cantidad de tampón
requerido; hasta 300 ml de tampón puede ser reque-
rido para grandes o geles para las transferencias de
60 minutos con el fin de evitar que la pila se seque o
se convierta en el tampón empobrecido.
Saturar al menos 3 piezas del papel secante con el
tampón de transferencia. Uno por uno, el centro de
cada hoja en el electrodo inferior y eliminar todo el
aire atrapado por rodar una pipeta limpia o un rodillo
desde el centro hacia los bordes.
5
Preparar la membrana
Para cada gel, corte 1 membrana del mismo tamaño
que el gel o ligeramente más pequeño. (Una
membrana más grande puede ponerse en contacto
con un panel de electrodos, la creación de una vía por
la cual la corriente puede pasar por alto el gel.)
Pre-húmedo nitrocelulosa o membranas de nylon con
agua destilada. Pre-húmedo PVDF o otras membranas
hidrofóbicas con metanol. A continuación, disfrutar de
todo tipo de membrana en tampón de transferencia
durante 2-5 minutos.
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