Utilización; Aplicación Clínica Y Principio Del Ensayo - AESKU.DIAGNOSTICS AESKULISA Histone-H3 Manual De Instrucciones

1 Utilización
AESKULISA Histone-H3 es un enzimoinmunoensayo en fase sólida con histone H3 nativa
humana aisladas de la línea celular HeLa para la detección cuantitativa y cualitativa de
anticuerpos contra histonas H3 en suero humano.
El ensayo es una herramienta para el diagnóstico diferencial del lupus eritematoso sistémico
(LES).
2 Aplicación clínica y principio del ensayo
Las histonas son proteínas básicas pequeñas de 11 a 21 kDa que constituyen un conjunto
de proteínas interactuantes organizando y constriñendo la topología del DNA en la mayoría
de células eucariotas hacia una partícula llamada nucleosoma. En esta partícula las cuatro
histonas H2A, H2B, H3 y H4 forman un octámero (H2A, H2B, H3, H4)2 alrededor del cual se
enrrollan 146 bp de dsDNA dando 1 ¾ vueltas. La histone H1 interactúa con el nucleosoma
y juntamente con el DNA unido conecta los nucleosomas vecinos.
Los anticuerpos contra histonas se dan en pacientes con LES con una frecuencia del 50 % y
durante las fases actives del LES con una frecuencia incluso mayor (80%).
No son específicos para el LES, especialmente cuando no están asociados con anticuerpos
anti-dsDNA. También se encuentran en otras enfermedades reumáticas inflamatorias como
la artritis reumatoide (en títulos bajos y principalmente contra H1), o la esclerosis sistémica y
la artritis crónica juvenil. Además estos anticuerpos se encuentran también en la cirrosis
biliar primaria (hasta el 70%) y en la hepatitis autoinmune (hasta el 35%).
Los anticuerpos anti-histona, en ausencia de anticuerpos contra el dsDNA, juegan un papel
importante en el diagnóstico del LE inducido por drogas siendo ahí encontrados en un 95%
de los casos. Estas drogas inducen síntomas de articulación y piel, así como las diferentes
especificidades anti-histona, mientras que nunca manifestaciones renales. Los anticuerpos
anti-histona en el LE inducido por drogas son temporales y desaparecen en pocos meses
después de la retirada de la droga inducidora.
Principio del test
Las muestras de suero diluidas 1:101 se incuban en la microplaca revestida con el
antígeno específico. Los anticuerpos de los pacientes, si están presentes en la
muestra, se unen al antígeno. La fracción no unida es eliminada por el lavado en el
paso siguiente. Después, las inmunoglobulinas anti-humanas conjudagas con
peroxidasa (conjugado) se incuban y reaccionan con el complejo antígeno-anticuerpo
de las muestras dentro de la microplaca. El conjugado no unido es retirado a través del
lavado en el paso siguiente. La adición del substrato-TMB genera una reacción
colorimétrica (azul) enzimática que se detiene a través de ácido diluido (el color cambia
a amarillo). La intensidad de formación de color a partir del cromógeno depende de la
cantidad de conjugado unida al complejo antígeno-anticuerpo y es proporcional a la
concentración inicial de los respectivos anticuerpos en la muestra del paciente.
Product Ref.
3154
Product Desc. Histone-H3
Manual Rev. No. 003 : 2015-11-20
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