Qiagen PyroMark Q24 Manual De Uso página 26

14. Agite la placa de PCR a temperatura ambiente (15–25 °C) durante
5-10 min a 1400 rpm.
Las microesferas de sefarosa sedimentan rápidamente. La captura
de las microesferas debe tener lugar justo después de la agitación.
Durante este paso, prepare la estación de vacío PyroMark Q24
MDx para la preparación de las muestras (consulte el Apéndice A,
página 43).
15. Agregue 25 µl de tampón de annealing PyroMark a cada pocillo de
la placa PyroMark Q24 que vaya a utilizarse con el PyroMark Q24
Control Oligo inmovilizado para su procesamiento con la estación de
vacío PyroMark Q24 MDx. Agregue 25 µl del PyroMark Q24 Control
Oligo diluido (0,04 µM) a otros 8 pocillos de acuerdo con la
configuración de la serie analítica.
Mantenga uno de los portaplacas PyroMark Q24 (suministrados
con la estación de vacío PyroMark Q24 MDx) a temperatura ambiente
(15–25 °C) y utilícelo como soporte al preparar y mover la placa.
16. Coloque la placa (o las tiras) de PCR y la placa PyroMark Q24 en la
mesa de trabajo de la estación de vacío PyroMark Q24 MDx
(consulte la figura 9).
Asegúrese de que la placa tenga la misma orientación que
durante la carga de las muestras.
Figura 9. Colocación de la placa (o las tiras) de PCR y de la placa PyroMark Q24
en la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. Las posiciones marcadas contienen
etanol al 70% (1), solución desnaturalizante PyroMark (2), tampón de lavado PyroMark
(3) y agua ultrapura (4, 5). P: Posición de detención.
17. Abra el interruptor de vacío para aplicar vacío a la herramienta de
preparación del vacío.
18. Descienda con cuidado las sondas de filtro a la placa (o las tiras) de
PCR para capturar las microesferas que contienen el molde
inmovilizado. Mantenga las sondas en posición durante 15 s. Tenga
cuidado al asir la herramienta.
26 Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015