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VII. Dilution du lait en poudre
Dans un bécher approprié, ajoutez 10g de lait en poudre et 90ml d'eau chaude distillée (40°C); mélangez éner-
giquement.
VIII. Protocole d'utilisation
Cette procédure permet de réaliser de manière simple un seul test à la fois ou une série de tests en parallèle.
Dans le second cas, réalisez le test en cascade et évitez tout retard lorsque vous mélangez les réactifs au lait ainsi
que lorsque vous introduisez et retirez les bandelettes. Assurez-vous de respecter le même temps d'incubation et
la même température pour chaque échantillon. Si vous testez plus de 3 échantillons, il est conseillé d'utiliser une
multipipette. Si vous avez plus de 8 échantillons, répartissez-les en séries de maximum 8 échantillons.
1.
Pour réaliser le test, installez-vous dans un endroit propre et sec ; lavez-vous et séchez-vous les
mains ;
2.
Allumez le Heatsensor (voir manuel d'utilisation) et attendez que la température ait atteint 40°C
- Il faut environ 2 minutes pour que la température se stabilise à 40°C ;
3.
Sortez le kit du frigo et attendez qu'il revienne à température ambiante avant d'ouvrir les
microcuvettes de réactifs. Pendant ce temps, lisez attentivement le protocole d'utilisation ;
- Les deux composants principaux du test, à savoir les bandelettes et les microcuvettes contenant
les réactifs lyophilisés, sont placés dans des tubes en plastic blancs.
4.
Rassemblez les échantillons de lait à tester et identifiez-les de manière claire et distincte ;
- Les échantillons de lait doivent être liquides et homogènes. Ils ne doivent pas contenir de
grumeaux ni sédimenter. La température idéale de l'échantillon est de 4 à 20°C.
5.
Ouvrez un tube en plastic et prenez autant de microcuvettes qu'il y a d'échantillons de lait à tester
(si nécessaire, les contrôles positif et négatif compris) ;
- Pour ouvrir un tube, retirez l'anneau de sécurité en le poussant vers le bas et enlevez le bouchon
en le poussant vers le haut à l'aide de votre pouce ;
- Après avoir pris les réactifs, le tube doit toujours être refermé correctement ;
- Soyez vigilant: si vous n'avez pas l'intention d'utiliser les 8 microcuvettes d'une barrette en une
fois, laissez la rangée des 8 capuchons solidaire, replacez les 8 capuchons sur les microcuvettes
non utilisées et remettez-les immédiatement dans le tube blanc sans endommager les bandelettes.
Refermez correctement le tube.
6.
Placez les microcuvettes sur le bloc chauffant qui indique 40°C ;
7.
Placez une nouvelle pointe sur la micropipette et ajoutez 200µl de lait dans chaque microcuvette ;
8.
ATTENTION: dès que le lait est mélangé aux réactifs, la réaction commence. Mélangez donc
rapidement et enclenchez DIRECTEMENT le chrono en appuyant sur START (RUN)* pour
commencer la première incubation de 3 minutes ;
- Au cours de la première incubation, les récepteurs et l'anticorps monoclonal détectent la
présence éventuelle d'antibiotiques dans l'échantillon de lait. La réaction complète dure 3 minutes.
9.
Pendant ce temps, ouvrez le tube et prenez autant de bandelettes qu'il n'y a d'analyses en cours.
Refermez le tube. Déposez les bandelettes sur une surface propre et sèche et indiquez sur la partie
cellulose de chaque bandelette le numéro correspondant à l'échantillon de lait concerné ;
10.
Quand le signal sonore retentit, les 3 minutes sont terminées. Appuyez sur START (STOP)* pour
arrêter le chrono et introduisez les bandelettes dans les microcuvettes correspondantes restées
sur l'incubateur ;
- Veillez à introduire dans la microcuvette la bandelette qui portera la même identification que celle
de l'échantillon de lait concerné.
11.
Commencez la seconde incubation de 3 minutes en appuyant sur START (RUN)*;
12.
Lorsque la seconde incubation de 3 minutes est terminée, appuyez à nouveau sur START (STOP)*
pour arrêter le chrono ; retirez les bandelettes des microcuvettes et déposez-les sur une surface
propre et sèche ;
13.
Si vous n'avez pas l'intention de réaliser d'autres tests Trisensor dans la journée, replacez tous les
éléments dans la boite et remettez le kit au frigo à une température de 2 à 8°C.
*(voir le manuel d'utilisation du Heatsensor – pour les utilisateurs du Heatsensor DUO, les étapes
9 à 12 sont simplifiées)
IX. Analyse visuelle des résultats (voir Figure A)
Procédez à l'analyse visuelle des résultats de la façon suivante:
14.
Vérifiez d'abord que la ligne contrôle (ligne supérieure) est visible. Si ce n'est pas le cas, l'analyse
est non valable, ne commencez (ou continuez) pas l'interprétation ;
15.
Si la ligne contrôle (ligne supérieure) est visible, interprétez alors les trois lignes test comme suit :
16.
Examinez une ligne test à la fois et comparez-en l'intensité colorée avec celle de la ligne contrôle
(commencez par la ligne inférieure des ß-lactames par exemple) ;
- 10 -
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