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Funcionamiento
4 6
E l l o f i n a l i z a e l p r o c e d i m i e n t o d e e m p a q u e t a d o d e l a c o l u m n a . L i m p i e l o s r e s t o s d e
t a m p ó n o s u s p e n s i ó n d e s d e l a p a r t e s u p e r i o r d e l a d a p t a d o r . E l e s p a c i o e x i s t e n t e
e n t r e l a c a b e z a d e l a d a p t a d o r y l a p a r t e s u p e r i o r d e l a c o l u m n a d e b e e s t a r s e c o
y l i m p i o o l l e n a r s e c o n e t a n o l a l 2 0 % p a r a p r e v e n i r e l c r e c i m i e n t o b a c t e r i a n o .
C o m p r u e b e s i e m p r e e l r e n d i m i e n t o d e l a c o l u m n a e m p a q u e t a d a a n t e s d e
N o t a :
u t i l i z a r l a . C o n s u l t e l a s i n s t r u c c i o n e s d e e s t e p r o c e d i m i e n t o e n l a s e c c i ó n
5 . 2 q u e a p a r e c e a c o n t i n u a c i ó n .
5.2
Evaluación de la columna
L a e f i c i e n c i a d e l a c o l u m n a d e p e n d e d e l g r a d o d e e m p a q u e t a d o . U n a c o l u m n a
m a l e m p a q u e t a d a d a l u g a r a u n f l u j o i r r e g u l a r , u n e n s a n c h a m i e n t o d e l a z o n a y
u n a r e d u c c i ó n d e l a r e s o l u c i ó n . P o r t a n t o , e s i m p o r t a n t e t e n e r u n m é t o d o
m e d i a n t e e l q u e p u e d a e x a m i n a r s e l a c o l u m n a a n t e s d e s u p u e s t a e n
f u n c i o n a m i e n t o . D i c h o m é t o d o d e b e s e r s i m p l e , c u a n t i t a t i v o y n o d e b e r í a
i n t r o d u c i r m a t e r i a l e s c o n t a m i n a n t e s . T a m b i é n e s u n a v e n t a j a q u e p u e d a
u t i l i z a r s e e l m i s m o m é t o d o p a r a c o n t r o l a r e l r e n d i m i e n t o d e l a c o l u m n a d u r a n t e
s u p e r i o d o a c t i v o , d e f o r m a q u e s e a f á c i l d e t e r m i n a r c u á n d o d e b e r e e m p a q u e t a r s e
o s u s t i t u i r s e e l g e l .
D e b e n e v i t a r s e m é t o d o s q u e u t i l i c e n c o l o r a n t e s c o m o a z u l d e x t r a n o , y a q u e n o
c u m p l e n l o s c r i t e r i o s a n t e r i o r e s y n o p u e d e n u t i l i z a r s e c o n g e l e s d e c r o m a t o -
g r a f í a d e a f i n i d a d o d e i n t e r c a m b i o i ó n i c o .
L a e x p e r i e n c i a h a d e m o s t r a d o q u e e l m e j o r m é t o d o p a r a e x p r e s a r l a e f i c i e n c i a
d e u n a c o l u m n a e s e n c u a n t o a l a a l t u r a e q u i v a l e n t e a u n a p l a c a t e ó r i c a , H E T P , y
e l f a c t o r d e a s i m e t r í a d e l p i c o A
a p l i c a n d o a l a c o l u m n a u n a m u e s t r a d e s o l u c i ó n d e N a C l o d e a c e t o n a p o r
e j e m p l o .
E s i m p o r t a n t e q u e l a c o l u m n a e s t é e q u i l i b r a d a d e f o r m a a d e c u a d a a n t e s d e
e v a l u a r e l e m p a q u e t a d o ( 2 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a ) . E s p r e f e r i b l e r e a l i z a r t r e s
c a r r e r a s d e p r u e b a p a r a v e r s i l o s v a l o r e s d e l t e s t s o n o n o e s t a b l e s . S i u n m a l
r e s u l t a d o m e j o r a d u r a n t e e s t a p r u e b a , l a r a z ó n p u e d e s e r q u e l a c o l u m n a n o
e s t u v i e r a d e b i d a m e n t e e q u i l i b r a d a . P a r a c o m p r o b a r q u e e l l e c h o e s e s t a b l e , h a g a
f u n c i o n a r l a c o l u m n a a u n p r e s i ó n d e l 7 0 % d e l e m p a q u e t a d o d u r a n t e 2 0 h o r a s y
v u é l v a l a a p r o b a r ( p r e f e r i b l e m e n t e t r e s c a r r e r a s d e p r u e b a ) .
T e n g a e n c u e n t a q u e l o s p i c o s d e p r e s i ó n p u e d e n p r o d u c i r u n m a l e m p a q u e t a d o
( a g r i e t a m i e n t o ) . S i s u c e d e , s e n e c e s i t a u n a t r a m p a d e l a i r e y u n a v á l v u l a
d e s p r e s u r i z a d o r a e n t r e l a b o m b a y l a c o l u m n a . E s t a v á l v u l a s e s i t u a r á e n t r e l a
t r a m p a d e a i r e y l a c o l u m n a .
. E s t o s v a l o r e s p u e d e n d e t e r m i n a r s e f á c i l m e n t e
s
C o l u m n a s B P G M o d o d e e m p l e o 1 8 - 1 1 7 0 - 7 0 A B
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