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C o l u m n a : B P G 3 0 0
G e l : S e p h a r o s e 6 F a s t F l o w
A l t u r a d e l l e c h o : 5 7 , 5 c m
V o l u m e n d e l l e c h o : 4 0 , 6 l i t r o s
E l u y e n t e : A g u a d e s t i l a d a
M u e s t r a : 1 , 0 5 l i t r o s
( a c e t o n a 1 % , N a C l 1 % )
Í n d i c e d e f l u j o : 1 9 c m / h
V
= 1 8 , 8
e
W
= 0 , 9
h
H E T P = 0 , 0 2 4 c m
a = 0 , 9 0
b = 0 , 8 5
b / a = 0 , 8 5 / 0 , 9 0
A
= 0 , 9 4
s
C o l u m n a s B P G M o d o d e e m p l e o 1 8 - 1 1 7 0 - 7 0 A B
5.2.1
Elección de la muestra de prueba para columnas
E l m a t e r i a l m á s a d e c u a d o p a r a r e a l i z a r e l t e s t e n l a c o l u m n a e s l a m u e s t r a q u e
t i e n e q u e a n a l i z a r s e , a u n q u e e s t o n o s i e m p r e e s p r á c t i c o n i e c o n ó m i c o . C o m o
a l t e r n a t i v a , p u e d e u t i l i z a r s e u n a s o l u c i ó n d e N a C l o a c e t o n a p a r a o b t e n e r u n a
b u e n a a p r o x i m a c i ó n d e l a c a l i d a d d e l e m p a q u e t a d o d e l a c o l u m n a . E l e l u i d o s e
c o n t r o l a m i d i e n d o l a c o n d u c t i v i d a d o l a a b s o r c i ó n U V , y e l p e r f i l r e s u l t a n t e d e
e l u c i ó n s e u t i l i z a p a r a c a l c u l a r e l v a l o r d e H E T P .
L a s v e n t a j a s d e u t i l i z a r l a s o l u c i ó n d e N a C l e s q u e s e p u e d e c o n s e g u i r c o n
f a c i l i d a d y e m p l e a r s e c o n t o t a l s e g u r i d a d p a r a r e a l i z a r t e s t s e n c u a l q u i e r
c o l u m n a . U n a d e s v e n t a j a e s q u e e l N a C l p u e d e i n t e r a c c i o n a r c o n l a m a t r i z d e l
g e l , e s p e c i a l m e n t e e n m a t r i c e s d e i n t e r c a m b i o i ó n i c o y d a r , p o r t a n t o , r e s u l t a d o s
e r r ó n e o s .
S i n e m b a r g o , l a a c e t o n a n o i n t e r a c c i o n a c o n l a m a t r i z y s e d e t e c t a p o r a b s o r c i ó n
U V a 2 8 0 n m . A l t e r n a t i v a m e n t e , s e p u e d e a u m e n t a r 1 0 v e c e s l a c o n c e n t r a c i ó n
d e l t a m p ó n y u t i l i z a r s e c o m o s o l u c i ó n t e s t .
E n l a F i g . 5 - 1 3 s e p r e s e n t a u n t r a z a d o U V d e a c e t o n a e n u n a a p l i c a c i ó n t í p i c a d e
u n a c o l u m n a B P G y d a l o s v a l o r e s c a l c u l a d o s d e H E T P y A
C r o m a t o g r a m a d e p r u e b a q u e m u e s t r a l o s c á l c u l o s d e H E T P y A
F i g 5 - 1 3 .
5.2.2
Cálculo de HETP
E l v o l u m e n d e l a m u e s t r a d e b e r í a s e r a p r o x i m a d a m e n t e u n 1 % d e l v o l u m e n t o t a l
d e l l e c h o , y l a c o n c e n t r a c i ó n d e N a C l 1 , 0 % v / v o e q u i v a l e n t e c u a n d o s e u t i l i c e u n a
s o l u c i ó n t a m p ó n d e a l t a c o n c e n t r a c i ó n . A l t e r n a t i v a m e n t e p u e d e u t i l i z a r s e
a c e t o n a 1 , 0 % v / v . E l f l u j o l i n e a l d e b e s e r d e 3 0 c m / h p a r a g e l e s d e 3 4 m y 5 0 m
y d e 2 0 c m / h p a r a g e l e s d e 9 0 m . P a r a e v i t a r l a d i l u c i ó n d e l a m u e s t r a , a p l í q u e l a
Funcionamiento
.
s
V
e
V
h
a
5
50%
b
10%
Volumen
.
s
4 7
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