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Geles de acrilamida
1
Preparar la solución de monómero y verter el gel. Preparar
la cantidad necesaria de solución de monómero. Purgar
y añadir el iniciador y el catalizador justo antes de verter
el gel. Pipetear la solución en una esquina del sándwich,
teniendo cuidado de no introducir burbujas de aire.
Véase más abajo para el nivel de la solución apropiada
de acuerdo con la aplicación.
No gel de apilamiento (sistema continuo). Solución
de llenado hasta justo debajo de la parte superior
del borde de la placa superior. Si las burbujas se
encuentran atrapados, retire con una pipeta o una
jeringa. Introducir un peine (con un ligero ángulo)
en cada sándwich, teniendo cuidado de no atrapar
burbujas de aire debajo de los dientes.
Club sándwich. Pipetear la solución en ambos
emparedados, llenando cada uno al mismo nivel por
debajo del borde con muescas.
Gel de apilamiento. Completa solución a 3-4 cm por
debajo de la parte superior de la placa de vidrio. Esta
altura permite 1 cm de gel de apilamiento por debajo
de los pozos. Verter el gel y aplicar una plantilla (ver
paso 2). Después el gel se establece, preparar el gel de
apilamiento, como se describe a continuación.
La 2-D electroforesis (sistema de la proteína
discontinua). Completa solución de monómero de
aproximadamente 1 cm por debajo de la parte
superior de la placa de cristal para permitir 4 a
5 mm para la tira IPG o gel de tubo y un sello de
agarosa. (Un gel de apilamiento se requieren espacio
adicional). Selle la tira IPG o gel tubo en su lugar
con la agarosa disuelta en la gestión de memoria
intermedia. Tenga cuidado de no atrapar burbujas de
aire entre los geles de primera y segunda dimensión.
2
Superponer cada gel con una delgada capa de agua-
butanol saturado, agua o tampón de gel diluida para
evitar la exposición al oxígeno de gel. Lentamente
entregar la solución de superposición de una jeringa
•
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