Preparación De Los Reactivos Sbs; Descongelación De Los Reactivos Sbs; Preparación De Los Reactivos De Indexado; Descongelación De Los Reactivos De Indexado - Illumina HiSeq 2000 Manual De Uso

Guía del sistema HiSeq 2000
Preparación de los reactivos SBS
Los reactivos SBS se cargan en el instrumento al inicio del experimento. Para la preparación de reactivos,
siga estas instrucciones para descongelar reactivos SBS.
Descongelación de los reactivos SBS
1 Extraiga los reactivos CRM, IRM y USM de su almacenamiento a una temperatura de entre –25 °C y –
15 °C. Proteja IRM de la luz.
2 Descongélelos a una temperatura de entre 2 °C y 8 °C durante unas 16 horas.
También puede introducir los reactivos IRM y USM en un baño de agua desionizada a temperatura
ambiente hasta que se descongelen durante aproximadamente 90 minutos. Descongele CRM en un
baño de agua independiente.
NOTA
Cámbiese siempre de guantes después de manipular el reactivo CRM.
3 Invierta cada botella para mezclarlos.
4 Deje reposar en hielo los reactivos IRM y USM. Deje reposar en hielo el reactivo CRM por separado para
evitar la contaminación cruzada.
5 Utilice PW1, SB1, SB2 y SB3 directamente de su almacenamiento.
Preparación de los reactivos de indexado
Se utilizan reactivos de indexado durante las lecturas de índice de un experimento de secuenciación
indexado.
Los kits de generación de grupos PE y SR incluyen HP14, que se utiliza para la Lectura 1 del índice 1 (i7),
independientemente del tipo de celda de flujo. Solo el kit de generación de grupos SR incluye HP9, que es
necesario para un experimento de doble índice en una celda de flujo de lectura individual.
Tipo de experimento
"Paired-end" de un solo índice
"Single-read" (de lectura individual) de un
solo índice
"Paired-end" de doble índice*
"Single-read" (de lectura individual) de
doble índice
* Los experimentos "paired-end" de doble índice utilizan FRM, un reactivo "paired-end", para el índice 2.
Descongelación de los reactivos de indexado
1 Extraiga los reactivos siguientes, almacenados a una temperatura de entre −25 °C y −15 °C.
Para todos los experimentos indexados en una celda de flujo "paired-end": FDR y HP14
u
Para los experimentos de un solo índice en una celda de flujo de lectura individual: FDR y HP14
u
Para los experimentos de doble índice en una celda de flujo de lectura individual: FDR, HP9 y HP14
u
2 Introduzca los reactivos en un baño de agua desionizada a temperatura ambiente hasta que se
descongelen durante 20 minutos.
N.º de documento 15011190 v02 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Tipo de celda de Índice 1 (i7)
flujo
PE HP14
SR HP14
PE HP14
SR HP14
Índice 2 (i5)
--
--
--
HP9
14