Problemas Relacionados Con El Ensayo; Consideraciones Sobre El Ligando - Biacore T200 Manual De Funcionamiento

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7.2
Problemas   r elacionados   c on   e l   e
 

Consideraciones sobre el ligando

La   p érdida   d e   a ctividad   d el   l igando   e n   l a   s uperficie   d el   c hip   d el   s ensor   e s   u n  
factor   c omún   d e   p roblemas   r elacionados   c on   l a   a plicación.  
 
Consideraciones sobre las muestras
 
Para obtener más ayuda
Varias   p ublicaciones   d e   B iacore   p roporcionan   i nformación   a cerca   d el   d iseño   y  
la   e jecución   d e   l os   e xperimentos.   P ara   o btener   m ás   i nformación,   c omuníquese  
con   G E   H ealthcare.  
 
Si   n o   p uede   i nmovilizar   s uficiente   l igando   q ue   c onserve   s u   c apacidad   d e  
unión   a   l os   a nalitos,   p ruebe   m étodos   a lternativos   d e   i nmovilización   o  
utilice   u n   e nfoque   d e   c aptación.   E n   a lgunos   c asos   p uede   s er   s uficiente  
realizar   l a   i nmovilización   a   u n   p H   m ás   s uave   o   e vitar   l o   m ás   p osible   l a  
exposición   d el   l igando   a   l a   s olución   a mortiguadora   d e   i nmovilización.   E l  
asistente   d e   i nmovilización   a dmite   l a   d isolución   d el   l igando   e n   l a   s olución  
amortiguadora   d e   i nmovilización   i nmediatamente   a ntes   d e   l a   i nyección,  
para   l os   l igandos   q ue   n o   s oportan   l as   c ondiciones   d e   e xposición  
prolongada   a   l a   i nmovilización.  
Asegúrese   d e   q ue   e l   l igando   s oporte   l as   c ondiciones   d e   r egeneración   s in  
pérdida   d e   a ctividad.   S i   n o   p uede   l ograr   l as   c ondiciones   d e   r egeneración  
adecuadas,   c onsidere   u tilizar   u n   e nfoque   d e   c aptación   p ara   u sar   u n  
ligando   n uevo   e n   l a   s uperficie   p ara   c ada   c iclo   d e   a nálisis.  
Si   p lanea   a lmacenar   l os   c hips   d el   s ensor   c on   l igando   i nmovilizado   p ara  
utilizarlos   m ás   a delante,   r ealice   e xperimentos   d e   c ontrol   p ara   e stablecer    
si   e l   l igando   c onserva   s u   a ctividad   e n   l as   c ondiciones   d e   a lmacenamiento.  
Asegúrese   d e   s eleccionar   e l   p aso   d el   f lujo   c orrecto   p ara   u na   e jecución.   S i  
inyecta   m uestras   e n   u na   c elda   d e   f lujo   d onde   n o   h ay   l igando   i nmovilizado,  
no   v erá   u niones   c onsiderables.  
Asegúrese   d e   q ue   l as   m uestras   n o   s e   p recipiten   c on   l as   c oncentraciones   y  
condiciones   d e   s olución   a mortiguadora   u tilizadas.   I ncluso   l a  
microprecipitación   e n   l a   s uperficie   p uede   a fectar   g ravemente   l a   d etección  
(o,   e n   e l   p eor   d e   l os   c asos,   b loquear   e l   s istema   d e   f lujo)   y   e n   g eneral   s e  
percibe   a   m odo   d e   r uido   e xcesivo   e   i rregularidades   e n   l os   s ensogramas.  
Siempre   q ue   s ea   p osible,   l as   m uestras   d eben   p repararse   e n   s olución  
amortiguadora   d e   f uncionamiento   o   e n   c ondiciones   s imilares.   L os  
cambios   d rásticos   e n   l a   c omposición   d e   l a   s olución   a mortiguadora   e ntre  
la   s olución   a mortiguadora   d e   f uncionamiento   y   l a   m uestra   p ueden  
introducir   d efectos   q ue   q uizás   s ean   d ifíciles   d e   i nterpretar.  
Solución   d e   p roblemas    
nsayo  
7  
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