Cytek Biosciences Northern Lights NL-CLC Manual Del Usuario página 37

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Una vez definidos los controles, haga clic en Next (Siguiente).
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Cargue la muestra de control en el SIP y haga clic en Start (Iniciar) para obtener una vista previa
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de los datos de la muestra. Este paso le permite asegurarse de que todas las poblaciones
de todas las muestras de control están a escala. Si es necesario, ajuste la configuración
de ganancia.
La configuración de ganancia para todos los canales se puede seleccionar en el menú
desplegable User Settings (Configuración de usuario), o se puede ajustar individualmente para
cada canal mediante los selectores de ganancia de los detectores (V1–V16, B1–B14, R1–R8).
NOTA: CytekAssaySetting se generó midiendo la resolución óptima de linfocitos humanos
teñidos, con CD8 y CD4 marcados con diferentes fluorocromos. Esta configuración ofrece
un punto de partida para la mayoría de las aplicaciones de inmunofenotipado.
La pantalla Adjust Settings (Ajustar configuración) permite ver los datos para garantizar que las
partículas fluorescentes con tinción positiva estén a escala. Ajuste el umbral y las ganancias de
FSC y SSC. La ganancia de FSC se puede ajustar de 1 a 1000. Las ganancias de SSC y del canal
detector se pueden ajustar de 10 a 10 000. Si la población positiva está fuera de escala para
cualquier canal detector, baje el ajuste de ganancia para ese canal. Si la población positiva no
está suficientemente separada de la población negativa dentro de un canal concreto, verifique
que CytekAssaySetting está seleccionado, ya que esta configuración permite una resolución
adecuada. Si la población positiva todavía no está claramente separada de la población
negativa, revise la preparación de la muestra y el procedimiento de tinción.
Una vez confirmados los ajustes de ganancia, los controles sin teñir y de referencia estarán
listos para la adquisición.
NOTA: Es posible que los marcadores débiles no se separen de la población negativa,
independientemente de cuánto se aumente la ganancia.
Capítulo 4: QC & Setup (CC y configuración)
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