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Medición de la fluorescencia
Para medir la fluorescencia de la celda de flujo, el detector tiene que equilibrar la
necesidad de una alta selectividad (para distinguir longitudes de onda de
fluorescencia específicas) con la necesidad de una alta sensibilidad (para medir
intensidades bajas de fluorescencia).
Cuantificación
La fluorescencia es lineal a concentraciones bajas, sin embargo, puede dejar de
serlo a altas concentraciones.
Selección de la longitud de onda de emisión
Se usa un monocromador para seleccionar una longitud de onda de emisión.
Tubo fotomultiplicador
El tubo fotomultiplicador (PMT) produce una corriente proporcional al flujo de
fotones emitidos por las moléculas en la celda de flujo.
Barrido
Los detectores equipados con monocromadores de excitación y emisión pueden
barrer fácilmente varias longitudes de onda de excitación o emisión. Cambiar la
longitud de onda implica cambiar también la configuración del monocromador.
Durante un barrido, la configuración de un monocromador se mantiene
constante mientras el otro monocromador barre varias longitudes de onda.
Funcionamiento multicanal
Los detectores equipados con monocromadores de excitación y emisión pueden
cambiar la longitud de onda de las configuraciones de excitación y emisión. En
funcionamiento multicanal, los dos monocromadores se mueven rápidamente
entre los pares de longitud de onda seleccionados para producir múltples trazas
de cromatograma. Múltiples salidas pueden entonces proporcionar información
adicional a partir de una única separación.
Medición de la fluorescencia
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Solución de problemas
