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pipeta deslizando la punta por la pared interior del
recipiente.
5. Soltar luego el botón pulsador.
6. Expulsar la punta apretando el botón del expulsor de
punta.
Es necesario cambiar la punta solamente en
el caso de tomar la muestra de otro líquido
o cuando se cambia el volumen.
Aspiración de líquidos de alta densidad
AI pipetear líquidos de alta viscosidad o densidad dife-
rentes a las del agua, p. ej., sueros o disolventes orgáni-
cos, se crea una capa superficial de líquido en la pared
interior de la punta. Esta capa puede ser causa de error.
Dado que dicha capa se mantiene relativamente cons-
tante en operaciones sucesivas de pipeteado con la
misma punta, puede evitarse el error enjuagando antes
la punta y creando una película superficial antes del
pipeteado de la primer muestra. Esto se logra aspirando
la muestra y dispensándola nuevamente en el mismo
recipiente. Hecho esto, las muestras subsiguientes ten-
drán mayor exactitud y repetibilidad.
Es conveniente repetir esta operación de enjuague cada
vez que se modifique el volumen o se utilice una nueva
punta.
ATENCIÓN: Normalmente, el grado de error que re-
sulta de líquidos pesados o viscosos es insignificante
si el pipeteado se realiza despacio y con cuidado. Lo
más importante es dar a los líquidos algún tiempo para
seguir el cambio de presión manteniendo la punta de la
pipeta en su posición al menos 2 segundos, después de
dispensar la última gota y la aspiración.
En caso de que este método no dé valores exactos,
se puede lograr una compensación de acuerdo con el
Apartado 9.
Se recomienda anotar los valores de recalibración y co-
rrección con el fin de facilitar la calibración inversa a un
líquido estándar.
Filtros
Las pipetas de 5.000 μL y 10.000 μL llevan un filtro,
insertado en la parte inferior del cuerpo de la pipeta
(L), para evitar que el líquido penetre dentro del cuerpo,
ensuciando este y el émbolo. Se recomienda el uso del
filtro especialmente cuando se toman grandes cantida-
des de líquido. En el caso de mojarse el filtro, debe ser
cambiado por uno nuevo.
14 – PIPETAS VWR STANDARD LINE
9. Parámetros de pipeteo y recalibración
La calibración de las pipetas se realiza por gravimetría
con el uso de puntas del fabricante y agua destilada
de acuerdo con las normas ISO 8655 que especifica los
requisitos para el volumen de líquido máximo (nomi-
nal) accionado por la pipeta y para el 10% del volumen
máximo o mínimo de acuerdo con los valores dados
(Apartado 5).
Las pipetas están diseñadas para permitir la recalibra-
ción y la adaptación a diferentes técnicas de pipeteo
y propiedades líquidas (como temperatura, densidad
y viscosidad).
Se recomienda comprobar el funcionamiento de la
pipeta al menos una vez al año. La frecuencia de estas
comprobaciones deberá aumentar según la carga de
trabajo y los procesos de esterilización o autoclave, y si
se cambian algunas piezas.
Si durante el pipeteo, el error de precisión (la diferencia
entre el volumen aspirado real y el volumen prestableci-
do) excede el valor permitido que se muestra en la tabla
del Apartado 5, se deberá recalibrar la pipeta.
Al recalibrar la pipeta, el contador se debe ajustar al
valor del volumen del líquido obtenido mediante pesa-
je. La recalibración de la pipeta solo será válida con un
volumen de líquido accionado por la pipeta.
El volumen recomendado para la recalibración es del
19% del valor máximo (nominal) o el volumen mínimo
dependiendo de cuál de estos valores es mayor. Véase
la tabla de la página 10 para más detalles.
Parámetros para comprobar la precisión del pipeteo
La precisión del pipeteo puede verse afectada por fac-
tores como: las puntas que se utilizan, las características
del líquido a pipetear (densidad, viscosidad) y las condi-
ciones de trabajo (temperatura ambiente, presión).
Para determinar el error de precisión de la pipeta, se
deben cumplir los siguientes requisitos:
• La temperatura ambiente, la temperatura de la punta
de la pipeta y el líquido deberán estar entre los 20°C
y 25°C y permanecer con una exactitud de ±0,5°C.
• En las pruebas se usará agua destilada.
• La sensibilidad de la balanza se adecuará al volumen
"V" que se quiera verificar:
Manual de instrucciones – 15
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