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7 Solución de problemas
Descripción del
error
Proceso inusual-
mente lento (o
rápido)
Bandas desiguales
o distorsionadas
Se recoge muestra
teñida
36
Medida correctiva
Para aumentar o disminuir la velocidad de migración, ajuste
la tensión o corriente del 25 % - 50 % .
Ajuste las soluciones:
• Compruebe recetas, concentraciones de gel, soluciones
y diluciones. (Por ejemplo, no utilice Tris-HCl en lugar de
Tris.)
• Si se excede el pH que necesita una solución, no lo vuelva
a titular. Prepare tampón fresco.
• Elimine cualquier solución de acrilamida antigua y utilice
exclusivamente soluciones de máxima calidad.
• Utilice exclusivamente urea recién desionizada.
Compruebe la preparación y polimerización del gel.
Desgasifique la solución de gel de apilamiento y no atrape
burbujas de aire bajo los dientes del peine.
Superponga el gel de trabajo con n-butanol saturado con
agua antes de que comience la polimerización para evitar la
formación de una superficie de gel irregular.
Compruebe la preparación de la muestra.
Dialice o desalinice la muestra.
Centrifugue o filtre la muestra antes de cargarla para
eliminar partículas.
Junto al frontal del tampón:
• La proteína no está lo bastante restringida por el gel de
resolución; aumente el % T.
Cerca de la parte superior del gel cuando el frontal del
tampón llega a la parte inferior:
• El tamaño de poro del gel es demasiado pequeño.
Aumente el % T del gel de resolución.
• La proteína se ha precipitado. Caliente la muestra a
menos temperatura (70 °C o menos) durante 1–2
minutos.
SE 250/260 Mighty Small II Instrucciones de funcionamiento 29281629 AB
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