Tecnología A C V; Flujo Doble Focalizado (Dff); Célula De Flujo; Impedancia De Flujo Focalizado - Beckman Coulter Ac T 5diff OV Instrucciones De Uso

2.3 TECNOLOGÍA A
En el baño de diferencial, se mezclan 25 µl de sangre entera con 1.000 µl de reactivo A
5diff Fix durante 12 segundos y, a continuación, se estabilizan con 1.000 µl de A
Diluent durante 3 segundos. Esta reacción produce la lisis de los eritrocitos, preserva los
leucocitos en su tamaño original y tiñe de forma diferencial los monocitos, neutrófilos y
eosinófilos, siendo estos últimos los que se tiñen con mayor intensidad. El instrumento
mantiene los reactivos y la reacción a una temperatura regulada de 35 °C.
Los linfocitos, monocitos, neutrófilos y eosinófilos tienen una estructura nuclear y
morfológica y una intensidad de tinción únicas, por lo que absorben la luz de manera
diferente. Cada célula teñida es focalizada individualmente por el sistema de flujo doble
focalizado (DFF , Dual Focused Flow) y transportada a través de la célula de flujo utilizando la
presión de la muestra y el flujo del medio conductor de diluente.

Flujo doble focalizado (DFF)

La dinámica de fluidos DFF
focalizar células o partículas individuales en una corriente de diluente. La corriente de
muestra focalizada del analizador A
El DFF utiliza el fluido de medio conductor para rodear a las células suspendidas en el
diluente y hacerlas pasar de una en una a través del centro de la célula de flujo. El primer flujo
de medio conductor focaliza la muestra a través de la abertura de impedancia. El segundo
flujo de medio conductor mantiene el flujo de células focalizado a su salida por la abertura a
la célula de flujo óptica. La hidrodinámica de enfoque de la célula de flujo permite realizar
determinaciones exactas y rápidas célula a célula en un gran número de células individuales.
Figura 2.2 Proceso de flujo doble dirigido
Flujo de medio
conductor 1
Flujo de medio
conductor 2
Célula de flujo
En la célula de flujo se realizan análisis secuenciales del volumen celular (impedancia) y de la
absorbancia luminosa. Se inyecta un total de 72 µl de muestra a través de la célula de flujo
durante 15 segundos. La célula de flujo incorpora una abertura de 60 µm para el análisis del
volumen celular y un área de medición de 42 µm para la absorbancia luminosa.

Impedancia de flujo focalizado

La tecnología de impedancia de flujo focalizado determina la resistencia eléctrica de una
célula a su paso a través de la abertura de la célula de flujo. El cambio de la resistencia es
directamente proporcional al volumen de la célula.
PN 4237633DC
C
V
(Figura 2.2) utiliza un proceso de enfoque hidrodinámico para
C
•T 5diff tiene aproximadamente 40 µm de diámetro.
Ventana
Abertura
óptica
Inyector de
muestra
Flujo de
muestra
PRINCIPIOS DE USO
TECNOLOGÍA A
C
•T
C
•T 5diff
Dilución de
muestra
Fluido del
medio
conductor
7633003A
2
C
V
2-3