3M MDA2LMO96 Manual Del Usuario página 132

8. Clique no botão iniciar do software e selecione o instrumento a utilizar. A tampa do instrumento selecionado abre
automaticamente.
9. Posicione a 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular no 3M Equipamento de Detecção Molecular e
feche a tampa para iniciar o ensaio. Os resultados são fornecidos em 75 minutos, embora os positivos possam ser
detectados mais cedo.
10. Depois que o ensaio estiver concluído, remova a 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular do 3M
Equipamento de Detecção Molecular e descarte os tubos mergulhando-os em uma solução de 1-5% (v: v em água) de
água sanitária por 1 hora, fora da área de preparação do ensaio.
RECOMENDAÇÃO: Para minimizar o risco de falso-positivo devido à contaminação, nunca abra tubos reagentes que
contenham DNA amplificado. Isto inclui tubos de Controle de Reagentes, tubos de Reagente e tubos de Controle de
Matriz. Sempre descarte os tubos de reagentes selados mergulhando-os em uma solução de 1-5% (v:v em água) de água
sanitária por 1 hora, fora da área de preparação do ensaio.
Resultados e Interpretação
Um algoritmo interpreta a curva de saída de luz que resulta da detecção da amplificação do ácido nucleico. Os resultados
são analisados automaticamente pelo software e são codificados em cores de acordo com o resultado. Um resultado é
determinado positivo ou negativo através da análise de diversos parâmetros exclusivos de curvas. Resultados positivos
presumíveis são reportados em tempo real, enquanto resultados negativos e a inspecionar serão exibidos após a conclusão
da execução.
Amostras positivas presumíveis devem ser confirmadas conforme os procedimentos operacionais padrão de laboratórios,
ou seguindo o método de confirmação de referência apropriado
enriquecimento primário para o caldo de enriquecimento secundário (se aplicável), seguido por plaqueamento e
confirmação posterior de amostras isoladas utilizando métodos bioquímicos e sorológicos apropriados.
No contexto da VALIDAÇÃO NF, todas as amostras identificadas como positivas pelo 3M Ensaio para Detecção Molecular
de Listeria monocytogenes 2 devem ser confirmadas por um dos seguintes testes:
Opção 1: Usar o padrão ISO 11290
Opção 2: Implementar um método de confirmação consistindo do seguinte: Transferir 0,1 ml de caldo Demi-Fraser.
Despeje diretamente em agar Ottaviani Agosti, conforme descrito na in ISO 11290
Opção 3: Usar sondas de ácido nucleico conforme descrito no padrão EN ISO 7218
agar seletivo (veja a Opção 1 ou 2).
Opção 4: Usando qualquer outro método certificação com VALIDAÇÃO NF, cujo princípio precisa ser diferente do 3M
Ensaio para Detecção Molecular de Listeria monocytogenes 2. Deve-se utilizar o protocolo completo descrito para este
segundo método validado. Todas as etapas anteriores ao início da confirmação devem ser comuns a ambos os métodos.
No caso de resultados discordantes (presumidamente positivo com o método alternativo, não confirmado por um dos
meios descritos acima), o laboratório deve seguir os passos necessários para garantir a validade do resultado obtido.
OBS.: Até mesmo uma amostra negativa não resultará em leitura zero, uma vez que o sistema e os reagentes de
amplificação do Ensaio 3M Ensaio para Detecção Molecular de Listeria monocytogenes 2 têm uma unidade de luz
relativa (RLU) em "segundo plano".
Em casos raros de saída de luz incomum, o algoritmo rotula o caso como "Inspecionar". A 3M recomenda que o usuário
repita o ensaio para qualquer amostra a inspecionar. Se o resultado continuar a ser "Inspecionar", proceda o teste de
confirmação utilizando seu método preferencial ou conforme especificado pelos regulamentos locais
Apêndice A. Interrupção de Protocolo: Armazenamento e re-teste de lisados tratados termicamente
1. Para armazenar um ligado tratado termicamente, tampe novamente o tubo de lise com uma tampa limpa (consulte a
seção "Lise", 4.5)
2. Armazene a temperatura de 4 a 8°C por até 72 horas.
3. Prepare uma amostra armazenada para amplificação invertendo de 2 a 3 vezes para misturar.
4. Destampe os tubos.
5. Coloque os tubos de lisado misturados no 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular e aqueça a 100 ± 1°C
por 5 ± 1 minutos.
6. Retire o suporte de tubos LS do bloco de aquecimento e deixe esfriar no 3M Bloco de Resfriamento para Detecção
Molecular por pelo menos 5 minutos e, no máximo, 10 minutos.
7. Continue o protocolo na seção 'Amplificação' , descrita acima.
Em caso de dúvidas sobre aplicações ou procedimentos específicos, visite nosso site em www.3M.com/foodsafety ou
entre em contato com o seu representante ou distribuidor local da 3M.
começando pelo enriquecimento Demi-Fraser
(3)
10
PT
, começando com a transferência do caldo de
(1, 2, 3)
.
(3)
, realizado em colônias isoladas, no
(5)
(Português)