Hoefer TE22 Manual Del Usuario página 14

Fig 2. Transferencia de montaje de
la pila. La pila está orientado de
modo que las moléculas cargadas
negativamente migran hacia el
ánodo grises (+).
¡Importante! No overstuff la casete.
Nota: Trate de colocar el gel
correctamente la primera vez
porque las proteínas pueden
comenzar a transferir inmediata-
mente, una vez la transferencia
ha comenzado, moviendo el gel
distorsionar los resultados o hacer
que "las bandas de sombra" en la
mancha.
Los paneles de cassette están
codificados por colores: negro
(arriba) = cátodo lado gris (abajo)
= lado del ánodo.
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Coloque una de 3 mm de espesor de espuma de
la esponja en la cinta abrió sumergida y presione
suavemente hasta que todo el aire. Coloque una hoja
de papel secante en la esponja, y luego colocar la
lámina sobre el papel secante. Coloque el gel que
contiene una muestra que se ha separado electroforé-
ticamente y se equilibró (si es necesario) con tampón
de transferencia-en la membrana. Suavemente rodar
una pipeta de vidrio o tubo de ensayo sobre el gel
para eliminar el aire atrapado entre la membrana y
el gel. Cubrir el gel con una hoja de papel secante y
luego colocar una esponja del grosor adecuado (ver
el diagrama a continuación), de nuevo presionando
suavemente para eliminar el aire atrapado.
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Cierre la bandeja y presione ligeramente para cerrar
las pestañas. El casete ensamblada debe sostener el
gel en contacto firme con la membrana sin apretar
el gel. Si la pila parece flojo, añadir hojas de papel
secante, si la pila parece apretada, reemplazar la
esponja superior (por encima del gel) con una hoja
de papel secante. Si se quita la esponja inferior (por
debajo del gel), sustituir al menos dos hojas de papel
secante para crear un espacio entre la membrana y el
panel de casete.
Monte el cassette en una bandeja que
contiene el tampón de transferencia de
unos 3 cm de profundidad.
una esponja de 3 mm de
geles > 1,5 mm
-O-
una esponja de 6 mm para
geles ≤ 1,5 mm.
papel secante
gel
membrana
papel secante
un 3 mm de esponja