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Nota: cuidado en la orientación
de la tapa de manera que todas
las especies migran hacia la
membrana cuando el campo
eléctrico se aplica. La dirección
de migración depende de las
características de la muestra y el
pH del tampón de transferencia.
Si las especies de interés está
cargado negativamente en el
tampón de transferencia y la pila
está montado de modo que la
membrana es más cercano al lado
gris de la casete, entonces este
lado se enfrenta al ánodo (+). La
mayoría de las proteínas migran
hacia el ánodo en la Towbin Tris/
glicina sistema tampón/metanol
(independiente de la presencia
de SDS), y la mayoría de condi-
ciones, los ácidos nucleicos están
cargadas negativamente y también
migran hacia el ánodo.
¡Importante! Nunca permita que la
temperatura de la solución debe
exceder los 45 °C. El calor exce-
sivo puede causar que la unidad
se deforme.
•
p8
El montaje final y la transferencia de
1
Instale la tapa
Los casetes están codificados por color para que coin-
cida con los cables en la tapa. Para transferir hacia el
ánodo, orientar la tapa de manera que el medio gris
de la cassette se enfrenta al ánodo (+), o plomo rojo,
y el medio negro de la cassette se enfrenta al cátodo
(–), o plomo negro. Asegúrese de que el asiento de
banana en los conectores en la tapa.
2
Utilice sólo una fuente de alimentación aprobadas,
tales como el Hoefer PS2A200, PS200HC o PS300B.
Asegúrese de que la fuente de alimentación está
apagada y todos los controles se establecen en cero.
Conecte los cables codificados por color de la tapa de
la unidad de transferencia en la oferta, el poder rojo en
el conector rojo de salida, y el cable negro a la salida
de gato negro. En la mayoría de los sistemas, el cable
rojo es el ánodo (+), y el cable negro es el cátodo (–).
3
La refrigeración se recomienda
Cualquier ajuste que se traduce en más de 5 W de
potencia generará el calor suficiente como para
requerir el control de calor activo. Un baño de circu-
lador refrigerado con agua se debe establecer en alre-
dedor de 10 °C. (Si se utiliza 50/50 de etileno glicol/
agua, la temperatura puede ser menor.) Sensación
Térmica del búfer antes de su uso si es posible.
Los parámetros típicos de transferencia
Parámetros para la muestra y el sistema de
amortiguación debe ser determinada empíricamente.
Buffer
Corriente (A)
Voltaje (V)
Tiempo transferencia ~1 hora
Temp. refrigerante
Proteína
Ácidos nucleicos
Towbin
1X TBE o 1X TAE
0,4
0,3
~100
50
~1 hora
10 °C
10 °C o meno
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