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Electrotransferencia notas
Ventajas de transferencia electroforética
Transferencia electroforética de las proteínas
y ácidos nucleicos es mucho más rápido que
los métodos descritos por primera secante del
Sur para el ADN, Alwine et al. Para el ARN, o
Renart et al. para las proteínas.
El método de transferencia tanque utiliza
corriente de alta para reducir el tiempo de
transferencia de la mayoría de las muestras a
45-60 minutos.
Transferencia electroforética puede mejorar la
eficiencia de transferencia a través de la no-electro-
forético secante, especialmente para las proteínas,
pero ninguna técnica de transferencia cuantitativa
se ha desarrollado todavía debido a la compleji-
dad de las reacciones. Recuperación cuantitativa
no es realmente necesaria para la mayoría de los
propósitos porque macromoléculas de unión a una
membrana aumenta la sensibilidad de los métodos
de detección tales como autorradiografía y permite
la detección de proteínas específicas por anticuer-
pos o etiquetas de afinidad, y de ácidos nucleicos
específicos por hibridación con cadenas comple-
mentarias de ARN o ADN .
El tampón puede ser elegido para dar lugar a
una transferencia hacia el cátodo sea o el ánodo.
El pH debe ser tal que todas las especies de inte-
rés se cargan y migran en la misma dirección.
La fuerza iónica no debe ser demasiado alta, ya
que esto producirá una corriente excesiva y el
calor. Por esta razón, las condiciones elevadas
de sal utilizadas por Southern Blot para capilar
de ADN no puede ser utilizado. Los sistemas
tampón más ampliamente utilizados son los de
Towbin et al. para la transferencia de proteínas,
y de Bittner et al. para la transferencia de ácidos
nucleicos. Los sistemas tampón para la transfe-
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