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Manual del usuario de BD MAX™ System
Muestra
Mezclar los
Lisis y
reactivos
fijación
Extracción de ARN
El proceso de extracción de ARN es muy similar al de extracción de ADN/ATN y se representa
con un esquema en la figura 1-2.
La lisis de las muestras y la extracción del ARN se llevan a cabo en cada tira de reactivos
individuales. Las flechas rojas representan el calor que el módulo de calentamiento aplica al tubo
de reacción. El cuadro gris y rojo (etiquetado con las letras NS) representa un imán que se eleva y
desciende para acercarse al tubo de reacción de cada tira de reactivos individuales cargada en la
gradilla de muestras.
Para comenzar el proceso, el instrumento transfiere un volumen establecido de la muestra
preparada al tubo de extracción para rehidratar los reactivos de extracción. Tras las rehidratación,
la mezcla se transfiere al tubo de reacción. Se aplica calor al tubo de reacción y se lisan las
células de la muestra para liberar el ARN. El ARN presente en la muestra se liga a microesferas
magnéticas que han sido recubiertas con una matriz de afinidad de ARN patentada. El imán se
eleva para inmovilizar el ácido nucleico ligado a las microesferas magnéticas. Se aspira el
sobrenadante del tubo. El imán desciende y libera las microesferas magnéticas. Se añade
ADNasa al tubo para degradar el ADN presente. El imán se eleva e inmoviliza el ARN ligado a las
microesferas magnéticas. Se retira el sobrenadante del tubo y el imán desciende. Se añade
tampón de lavado de ARN al tubo para limpiar las microesferas. Se eleva el imán y se retira el
sobrenadante que contiene los desechos celulares. Se añade tampón de elución de ARN C al
tubo de reacción y se calienta el tubo para liberar el ARN ligado a las microesferas magnéticas. El
imán se eleva e inmoviliza las microesferas magnéticas. El ARN liberado se transfiere del tubo de
reacción al tubo insertable de la posición 3 de la tira de reactivos individuales, donde ahora está
preparado para el análisis de PCR.
10
Lavar las
Concentrar las
microesferas
microesferas y
retirar el
sobrenadante
Figura 1-1. Extracción de ADN/ATN
preparado para
Incubar con
Pipetear el
tampón de
ácido
elución de
nucleico
ADN/ATN
liberado
ADN/ATN
PCR
Transferir
el ADN/ATN
al tubo
insertable de
la posición 3
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