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siguiente descripción general se resumen las etapas, los componentes y la teoría de funcionamiento
asociados con el rendimiento de un protocolo de proceso completo en BD MAX™ System.
•
Las muestras se introducen en los tubos de tampón de muestra conforme a las instrucciones
del prospecto del paquete.
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Una vez que se ha escaneado la etiqueta de código de barras de los tubos de tampón de
muestra, estos se colocan en una gradilla de muestras.
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La información de las muestras se introduce mediante el teclado o con un lector de
códigos de barras externo.
•
A continuación, se colocan en la gradilla de muestras las tiras de reactivos individuales
necesarias para la serie y se fijan de manera segura.
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Los tubos de extracción liofilizados precintados se insertan en las posiciones pertinentes
de cada tira de reactivos individuales.
•
Los tubos de reactivo de Master Mix y/o los reactivos líquidos para UDP precintados se
insertan en las posiciones correctas de cada tira de reactivos individuales.
•
Se coloca una BD PCR Cartridge en un cajón situado detrás de cada gradilla de muestras
correspondiente.
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Se selecciona el UDP de cada ubicación de test pertinente y comienza la serie.
•
Una vez iniciada la serie, comienza la verificación de los tubos de tampón de muestra, las
tiras de reactivos individuales y los reactivos, seguida del proceso de extracción y
purificación.
•
Después de la extracción, el ácido nucleico purificado se mezcla con Master Mix,
cebadores y sondas. A continuación, el instrumento transfiere la muestra preparada para
la PCR al puerto de inyección de muestras de la pista adecuada de la BD PCR Cartridge.
•
Cuando se han cargado todas las muestras programadas, el cajón que contiene la
BD PCR Cartridge se lleva al lector, donde se realizan la detección y la amplificación por
PCR.
Extracción de ADN o ATN
La lisis de las muestras y la extracción del ADN/ATN se llevan a cabo en cada tira de reactivos
individuales. Las etapas del proceso de lisis y extracción se representan en un esquema en la
figura 1-1. Las flechas onduladas de color rojo representan el calor que el módulo de
calentamiento aplica al tubo de reacción. El cuadro gris y rojo (etiquetado con las letras NS)
representa un imán que se eleva y desciende para acercarse al tubo de reacción de cada tira de
reactivos individuales cargada en la gradilla de muestras.
Para comenzar el proceso, el instrumento transfiere un volumen establecido de la muestra
preparada al tubo de extracción para rehidratar los reactivos de extracción. Tras las rehidratación,
la mezcla se transfiere al tubo de reacción. Cuando es oportuno, se aplica calor al tubo de
reacción y se lisan las células de la muestra para liberar el ADN/ATN. El ADN/ATN presente en la
muestra está ligado a microesferas magnéticas que se han recubierto con una matriz de afinidad
de ácido nucleico patentada. El imán se eleva para inmovilizar el ADN/ATN ligado a las
microesferas magnéticas. Se aspira el sobrenadante del tubo. El imán desciende y libera las
microesferas magnéticas. Se añade el tampón de lavado de ADN/ATN al tubo para eliminar
cualquier resto de material que no se haya ligado específicamente. El imán se eleva e inmoviliza
el ADN/ATN ligado a las microesferas magnéticas. Se retira el sobrenadante del tubo y el imán
desciende. Se añade el tampón de elución de ADN/ATN al tubo de reacción y se calienta el tubo
para liberar el ácido nucleico ligado a las microesferas magnéticas. El imán se eleva e inmoviliza
las microesferas magnéticas. El ADN/ATN liberado se transfiere del tubo de reacción al tubo
insertable de la posición 3 de la tira de reactivos individuales, donde ahora está preparado para el
análisis de PCR.
1 – Introducción
9
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