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donde:
• GainRaman (Ganancia
más reciente de la función de normalizar unidades.
• PMTCountst (RecuentosPMT
de datos.
La normalización de las unidades de emisión da como resultado una intensidad de la señal agua/
Raman, en E
365 nm/E
x
mercurio-xenón no es uniforme en el intervalo de funcionamiento del detector y las longitudes de
onda UV bajas pueden degradarse más rápido que las longitudes de onda de normalización.
2.1.2.6.2 Unidades de energía
La alternativa a las unidades de emisión son las unidades de energía, similares a las que utilizan
los detectores de fluorescencia HPLC tradicionales. Estas unidades se correlacionan
directamente con la corriente anódica del PMT y se ven directamente influenciadas por el ajuste
de ganancia. Todas las variables de los instrumentos, como la intensidad de la lámpara, la
eficacia de los componentes ópticos y la ganancia, influyen directamente sobre la intensidad de
la señal de emisión. Como resultado, las unidades de energía son menos fiables. No obstante, al
calcular las unidades de energía para cumplir los protocolos establecidos, se debe usar la
siguiente ecuación:
Donde K aumenta la máxima señal de fluorescencia detectable a 10000 unidades.
2.2 Referencias
Consultar los siguientes textos para obtener información adicional sobre la detección de
fluorescencia:
N. Ichinose, G. Schwedt, F. M. Schnepel, and K. Adachi, Fluorometric Analysis in Biomedical
Chemistry, Chapter 5, Wiley-Interscience: Nueva York, 1991.
E. S. Yeung, ed., Detectors for Liquid Chromatography, Chapter 5, Wiley: Nueva York, 1986.
W. R. Seitz, in Treatise on Analytical Chemistry, 2nd ed., P. J. Elving, E. J. Meehan, I. M. Kolthoff,
eds., Part I, Vol. 7, Chapter 4, Wiley: Nueva York, 1981.
J. R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, Plenum: Nueva York, 1983.
S. G. Schulman, Fluorescence and Phosphorescence Spectroscopy : Physicochemical Principles
and Practice, Pergamon Press: Nueva York, 1977.
) y CountsRaman (Recuentos
Raman
) y Gaint (Ganancia
t
416 nm, de 100 unidades de emisión. La señal del espectro de
m
20 de octubre de 2020, 715006949ES Versión 00
Página 17
) = valores de la ejecución
Raman
) = valores en el momento de la recogida
t
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