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7 Solución de problemas
7.1 Solución de problemas de electroforesis
Problema
Franjas verticales de
proteínas
Bandas sesgadas o
distorsionadas
La muestra teñida se
recoge cerca de la
parte frontal de la
solución buffer.
La muestra teñida se
recoge cerca de la
parte superior del gel
cuando el frontal de
la solución buffer
llega a la parte infe-
rior.
La muestra teñida se
recoge en las partes
superior e inferior del
gel.
Baja resolución de
bandas
52
Causa posible
Partículas en la
muestra
Preparación y poli-
merización de gel
incompletas
Contacto irregular
entre geles de apila-
miento y de proceso
Preparación de
muestras
Concentración de gel
Concentración de gel
Precipitación
Concentración de gel
Condiciones de
procesamiento
miniVE Instrucciones de funcionamiento 29281778 AB
Solución
Centrifugue o filtre la muestra
antes de cargarla, para eliminar
las partículas.
Dialice o desalinice la muestra.
Desgasifique la solución de gel de
apilamiento y no deje que queden
burbujas de aire atrapadas bajo
los dientes del peine.
Cubra el gel de proceso con
butanol saturado de agua antes
de que comience la polimeriza-
ción, para evitar la formación de
una superficie de gel irregular.
Dialice o desalinice la muestra.
Centrifugue o filtre la muestra
antes de cargarla, para eliminar
las partículas.
El tamaño de poro del gel de reso-
lución no restringe bastante las
moléculas: aumente el porcen-
taje de acrilamida del gel.
El tamaño de poro del gel es
demasiado pequeño: reduzca el
porcentaje de acrilamida del gel
de resolución (o de apilamiento).
La proteína se ha precipitado.
Caliente la muestra a menor
temperatura (70 °C o menos)
durante 1 - 2 min.
El rango del peso molecular de la
muestra requiere un gradiente de
concentración de acrilamida para
resolver el rango completo de
tamaños de proteínas.
Realice la separación con un
ajuste más bajo de corriente o
tensión para reducir el calenta-
miento óhmico.
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