Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 29

Las aplicaciones de Ácido nucleico utilizan una
modificación de la ecuación Beer-Lambert (mostrada a la
derecha) para calcular la concentración de la muestra, en
la que el coeficiente de extinción y el camino óptico se
combinan y se utilizan como "factor".
Con las aplicaciones ADNbc, ADNmc y ARN, para
calcular la concentración de la muestra se utilizan los
factores generalmente aceptados para ácidos nucleicos
junto con la ley de Beer. Con la aplicación Factor
personalizado se utiliza el factor especificado por el
usuario.
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Coeficientes de extinción y factores
En términos de la ecuación Beer-Lambert, factor (f ) se define así:
ε
factor (f) = 1/(
donde:
ε
= coeficiente de extinción molar derivado en ng-cm/μl
b = camino óptico de la muestra en cm
Como resultado, la concentración de analitos (c) se calcula así:
ε
c = A * [1/( * b)]
O bien
c = A * f
donde:
c = concentración de analitos en ng/μl
A = absorbancia en unidades de absorbancia (A)
f = factor en ng-cm/μl (ver más abajo)
Factores utilizados
• ADNbc (factor = 50 ng-cm/μl)
• ADNmc (factor = 33 ng-cm/μl)
• ARN (factor = 40 ng-cm/μl)
• Factor personalizado (factor introducido por el usuario entre
15 ng-cm/μl y 150 ng-cm/μl)
Medir ADNbc, ADNmc o ARN
* b)
Guía del usuario de NanoDrop One 23