Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 97

Las concentraciones de colorantes se calculan a partir
del valor de absorbancia en la longitud de onda del
análisis del colorante, el coeficiente de extinción del
colorante y el camino óptico de la muestra. También se
puede utilizar una corrección de colorante de la línea en
pendiente.
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Absorbancia de colorante
• Los valores de absorbancia de los colorantes se miden en longitudes de
onda específicas. Consulte en
longitudes de onda utilizadas.
• Si está seleccionada Corrección de pendiente de colorante, se extrae
una línea de base lineal entre 400 nm y 750 nm y, por cada colorante,
se resta el valor de absorbancia de la línea de base en pendiente en cada
longitud de onda del análisis del colorante. Se proporcionan los valores
de absorbancia de colorante corregidos en la línea de base, que se
utilizan para calcular las concentraciones de los colorantes.
Corrección de colorantes
• Los colorantes predefinidos tienen valores de corrección conocidos
para A260 y A280. Consulte en
valores de corrección.
• La corrección A280 de colorante se resta del
utilizado para calcular la concentración proteínica.
Camino óptico de la muestra
• Para las mediciones de microvolúmenes, el software selecciona el mejor
camino óptico (entre 1,0 mm y 0,03 mm) en base a la absorbancia de
la muestra en la longitud de onda del análisis.
• Para las mediciones en cubeta, el camino óptico lo determina el ajuste
de Camino óptico de la cubeta en el software (consulte
generales).
• Los valores de absorbancia y espectros mostrados se normalizan en un
camino óptico equivalente de 10 mm.
Valores proporcionados
• Concentración proteínica. Proporcionada en la unidad seleccionada
(mg/ml o μg/ml). Los cálculos se basan en la ecuación Beer-Lambert
utilizando el valor de absorbancia de proteínas corregida.
• Concentración de Colorante 1/Colorante 2. Proporcionada en
pmol/μl. Los cálculos se basan en la ecuación de la ley de Beer
utilizando el valor de absorbancia de los colorantes corregido en línea
base (pendiente).
Medición de Proteínas y marcadores
Editor de colorante/cromóforo
Editor de colorante/cromóforo
valor de absorbancia A280
Guía del usuario de NanoDrop One
las
los
Ajustes
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