Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 45

Espectrofotometros micro-uv/vis
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Las concentraciones de ácidos nucleicos calculadas se
basan en el valor de absorbancia a 260 nm, el factor
utilizado y el camino óptico de la muestra. Podría
aplicarse también una corrección de línea base de punto
único (o una corrección de análisis).
La concentración se proporciona en unidades de masa.
En Internet se pueden encontrar calculadoras que
convierten las unidades de concentración másica a molar
a partir de la secuencia de la muestra.
Los valores de absorbancia a 260 nm, 280 nm y en
ocasiones a 230 nm se utilizan para calcular índices de
pureza de los ácidos nucleicos medidos. Los índices de
pureza son sensibles a la presencia de contaminantes en
la muestra, como los disolventes y reactivos residuales
que se utilizan normalmente en la purificación de la
muestra.
Thermo Scientific
Valores medidos
Absorbancia de A260
Nota: El valor de absorbancia a 750 nm se resta de todas las longitudes de
onda del espectro. Como resultado, la absorbancia a 750 nm será cero en el
espectro mostrado. Además, para las mediciones de absorbancia en
microvolúmenes y las mediciones tomadas en cubetas no estándar (las que
no son de 10 mm), los espectros se normalizan en un camino óptico
equivalente de 10 mm.
• Los valores de absorbancia de ácidos nucleicos de todos los
muestra
de Microarray se miden a 260 nm con el espectro corregido
a 750 y normalizado.
• Cuando
Corrección de análisis
absorbancia en la longitud de onda de la corrección se resta de la
absorbancia a 260 nm.
• Si se ha seleccionado uno o más colorantes, los
del colorante
a 260 nm también se restan de la absorbancia a 260 nm.
• Se proporciona la absorbancia corregida final a 260 nm, que además se
utiliza para calcular la concentración de la muestra.
Absorbancia de A280
• El valor de absorbancia normalizada y corregida (a 750) a 280 nm
(menos la corrección del colorante A280) se utiliza para calcular un
índice de A260/A280.
Medición de Microarray
está seleccionado, el valor de
valores de corrección
Guía del usuario de NanoDrop One
tipos de
39

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