Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 67

Espectrofotometros micro-uv/vis
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Las concentraciones de ácidos nucleicos calculadas se
basan en el valor de absorbancia a 260 nm, el factor
utilizado y el camino óptico de la muestra. Podría
aplicarse también una corrección de línea base de punto
único (o una corrección de análisis).
La concentración se proporciona en unidades de masa.
En Internet se pueden encontrar calculadoras que
convierten las unidades de concentración másica a molar
a partir de la secuencia de la muestra.
Los valores de absorbancia a 260 nm, 280 nm y en
ocasiones a 230 nm se utilizan para calcular índices de
pureza de los ácidos nucleicos medidos. Los índices de
pureza son sensibles a la presencia de contaminantes en
la muestra, como los disolventes y reactivos residuales
que se utilizan normalmente en la purificación de la
muestra.
Thermo Scientific
Valores medidos
Absorbancia de A260
Nota: Para las mediciones de absorbancia en microvolúmenes y las
mediciones tomadas en cubetas no estándar (las que no son de 10 mm), los
espectros se normalizan en un equivalente de camino óptico de 10 mm.
• Los valores de absorbancia de ácidos nucleicos se miden a 260 nm con
el espectro normalizado. Es el valor de A260 proporcionado cuando no
se ha seleccionado Corrección de línea base.
• Cuando
Corrección de línea base
absorbancia en la longitud de onda de la corrección se resta de la
absorbancia de la muestra a 260 nm. Se proporciona la absorbancia
corregida a 260 nm, que además se utiliza para calcular la
concentración de ácidos nucleicos.
Absorbancia A230, A280
• Para calcular los índices A260/A230 y A260/A280 se utilizan valores de
absorbancia normalizada a 230 nm, 260 nm y 280 nm.
Camino óptico de la muestra
• Para las mediciones de microvolúmenes, el software selecciona el mejor
camino óptico (entre 1,0 mm y 0,03 mm) en base a la absorbancia de
la muestra en la longitud de onda del análisis.
• Para las mediciones en cubeta, el camino óptico lo determina el ajuste
de Camino óptico de la cubeta en el software (consulte
generales).
• Los valores de absorbancia y espectros mostrados se normalizan en un
camino óptico equivalente de 10 mm.
Medición de ADN oligo o ARN oligo
está seleccionado, el valor de
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Ajustes
61

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