Dummy-Platte
Doppel – zwei Gele
Unter Verwendung einer
Dreifachplatte 2-Gel-
Sandwich – vier Gele
Gelauswahl:
Bei der Auswahl der Porengröße des zu verwendenden Gels muss achtsam
vorgegangen werden.
Die Porengröße oder % des Gels bestimmen das Auflösungsvermögen bei
verschiedenen Proteingrößen.
Siehe Tabelle 2 unten zu Einzelheiten bezüglich zu verwendendem Gelprozentsatz,
um die Größen der bezeichneten Proteine zu trennen.
Tabelle 2.
Prozentsatz Acrylamid Trennungslösung
5 %
7,5 %
10 %
12 %
15 %
17,5%
3. Bereiten Sie Gellösungen gemäß den Tabellen unten vor. Diese nennen die
Volumen von Lösungen der Standardstammlösungen. Sie müssen vorsichtig
gemischt werden, wobei die Generierung von Blasen zu vermeiden ist, da dies die
Polymerisierung durch die Entfernung von freien Radikalen hemmt.
Tabelle 3: Vorbereitung der trennenden Gellösung für zwei 20 x 20 cm
shiroGEL VERTICAL 20 Gele unter Verwendung von 1 mm Abstandhaltern.
Lösung
Destilliertes Wasser
70 ml
140 ml
60 – 220 KD
30 – 120 KD
20 – 75 KD
17 – 65 KD
15 – 45 KD
12 – 30 KD
5 %
7,5 %
41 ml
35,25 ml 29,6 ml
20
10 %
12 %
24,7 ml 17,6 ml
15 %
17,5%
11,7 ml