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9. Troubleshooting
La tabla siguiente representa los resultados que podrían ser obtenidos en las muestras
analizadas, el control positivo, el marcador de tamaño y el control negativo. En caso de obtener
un resultado inesperado, la interpretación y la razón más probable de dicho resultado se
muestran en la siguiente tabla.
Problema
analizadas
Señal de
fluorescencia
débil o nula
Señal de
fluorescencia
excesiva
Presencia de
más picos de
los esperados
Tabla 7. Interpretación de los posibles resultados con el kit imegen-SCAs
1
Cantidad y/o calidad de ADN molde insuficiente: Comprobar que el ADN ha sido
correctamente cuantificado y usar la cantidad indicada de ADN molde. En caso de que el ADN
haya sido correctamente cuantificado, comprobar su integridad y llevar a cabo una nueva
extracción si es necesario.
2
ADN molde impuro: Altas concentraciones de sales o un pH alterado pueden inhibir la PCR. Si
usa un ADN molde disuelto en un tampón de elución con un pH diferente de 8 o con
concentraciones altas de EDTA, el volumen de ADN no debería exceder el 20% del volumen total
de la reacción. Restos de los reactivos usados durante la extracción también pueden afectar a
la reacción de PCR. Si es así, limpie el ADN o prepare una nueva extracción.
3
Fallo en la electroforesis capilar: Revise si los parámetros del equipo son los especificados y
reinyecte las muestras.
Rev. 5
28/02/2020
Muestras
Positive
Marcador
control
de tamaño
√
√
√
√
√
√
√
√
√
√
√
√
√
Control
negativo
√
Resultado esperado
Cantidad y/o calidad del ADN molde
√
insuficiente
ADN molde impuro
Fallo en la electroforesis capilar
√
√
Fallo en la desnaturalización
√
Fallo en la PCR
Cantidad excesiva de ADN
√
Contaminación
Contaminación
Artefactos
expansiones
Resultados / Interpretación
1
2
4
5
6
7
7
9
Mosaicismo
característicos
8
Página 20 de 22
3
de
las
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