3. Reactivo DIAZO
El reactivo diazo para las determinaciones de bilirrubina directa se
debe preparar al momento utilizando los reactivos que están en los
juegos de pruebas, de la siguiente forma:
a.
Vierta 10 ml de agua destilada en la ampolla que contiene el
nitrito sódico y mezcle hasta disolver completamente. Si la
ampolla se almacena tapada y refrigerada de 2 a 8 ºC (36 a 46
ºF), la solución se puede usar según la necesidad hasta la fecha de
vencimiento que está impresa en la caja.
b.
Mezcle un volumen de la solución de nitrito sódico enfriada con
10 volúmenes de la solución de ácido sulfanílico. Si se utiliza los
volúmenes apropiados de estos reactivos, el volumen de reactivo
diazo se puede preparar según el número de pruebas a realizar con
un mínimo de reactivos sobrantes. La solución de reactivo diazo
resultante es estable durante por lo menos tres horas a 2 a 8 ºC
(36 a 46 ºF) o durante una hora a temperatura ambiente.
C. Preparación y manipulación de muestras
1.
Se puede usar plasma o suero con el Modelo BR2.
2.
Las muestras se deben proteger tanto como sea posible de la luz
(400-500 nm) para evitar la fotólisis de la bilirrubina sérica.
3.
La corrección por hemólisis puede ser de hasta 600 mg/dl.
Cualquier muestra que se ha cuidado para preservar la bilirrubina
(p. ej.: congelada a -20 ºC (-4 ºF) con mínima exposición a la luz)
se puede procesar en el Modelo BR2. Sin embargo, la corrección
por hemólisis se basa en la absorbancia de oxihemoglobina, la cual
difiere significativamente con respecto a la desoxihemoglobina y la
metahemoglobina. Para lograr una corrección óptima por hemólisis,
es necesario procesar muestras frescas.
Uso del instrumento
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