Waters ACQUITY Premier Guía De Mantenimiento página 27

para la muestra y la referencia. El detector obtiene un espectro de fluorescencia realizando los
siguientes tipos de barrido en la celda de flujo:
• Zero scan (Barrido cero): Caracteriza el espectro de absorbancia de la línea base de un
eluyente.
• Excitation sample scan (Barrido de muestra de excitación): Resta el barrido cero, de manera
que los resultados mostrados son solo los del espectro de excitación de la muestra.
• Emission sample scan (Barrido de muestra de emisión): Resta el barrido cero, de manera
que los resultados mostrados son solo los del espectro de emisión de la muestra.
Para obtener un espectro de excitación o emisión de una muestra, se debe realizar un barrido
cero seguido del barrido de muestra apropiado. Normalmente, un barrido cero se realiza con
eluyente puro y un barrido de muestras se realiza con el analito disuelto en el mismo eluyente.
3.7.5 Modo Spectrum λ-λ
Utilizando el modo de espectro lambda-lambda (λ-λ) del detector, se pueden determinar
máximos de fluorescencia para muestras desconocidas y utilizarlos para desarrollar rápidamente
métodos cromatográficos basados en el tiempo de retención. El modo Spectrum λ-λ (Espectro λ-
λ) crea un espectro que caracteriza la fluorescencia del analito a lo largo de los ejes de
excitación/emisión. En condiciones de flujo estáticas, el detector realiza el barrido de un intervalo
especificado de longitudes de onda de emisión sobre un intervalo definido de longitudes de onda
de excitación. De este modo se obtiene el gráfico de la fluorescencia en los ejes de longitud de
onda de excitación/emisión y los resultados aparecen en un archivo de datos.
Aparecen longitudes de onda de excitación a lo largo del eje que habitualmente muestra el
tiempo y los valores de longitud de onda se reducen en un factor de 10 para ajustarse al eje del
tiempo. El eje continúa etiquetándose como "minutos".
Requisito:
Se necesita una celda de cubeta opcional para el barrido en modo Spectrum λ-λ
(Espectro λ-λ).
3.8 Rendimiento de energía de la lámpara
En los detectores de fluorescencia de diseño convencional, la relación señal-ruido es
directamente proporcional a la entrada de energía de la lámpara en el instrumento. La entrada
de energía de la lámpara en el detector puede verse afectada por:
• La antigüedad y eficacia de la lámpara.
• Componentes ópticos o celda de flujo, o ambos, que no han recibido el mantenimiento
adecuado.
• Degradación normal de los componentes ópticos (incluido el PMT).
Los componentes ópticos se degradan lentamente con el paso del tiempo. En los detectores de
fluorescencia convencionales, la respuesta se incrementa aumentando la ganancia del PMT. Sin
10 de noviembre de 2021, 715006949ES Versión 01
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